Aller directement au contenu
RKO-E6
Tissu
Colon
Maladie
Carcinome du côlon
Synonymes
RKOE6

Documents

RKO-E6

Cell line · Référence du produit 305135

RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...

€550.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description
Les cellules RKO-E6 sont une lignée cellulaire humaine de carcinome colorectal dérivée de la lignée cellulaire RKO par mutagenèse supplémentaire. Ces cellules sont couramment utilisées dans la recherche sur le cancer, en particulier sur le cancer colorectal. La variante E6 de la lignée RKO offre un profil distinct qui est utile pour examiner les effets de manipulations génétiques spécifiques et étudier les mécanismes moléculaires de la tumorigenèse et des métastases dans le cancer colorectal. Les cellules RKO-E6 se caractérisent par plusieurs traits uniques, notamment des altérations dans les gènes liés à la régulation du cycle cellulaire, à l'apoptose et aux voies de réparation de l'ADN. Ces modifications renforcent l'utilité de la lignée cellulaire pour l'étude des effets biologiques de l'extinction ou de la surexpression de gènes dans le contexte du cancer colorectal. Par exemple, les cellules RKO-E6 ont été utilisées pour étudier l'impact des gènes suppresseurs de tumeurs et des oncogènes sur le comportement des cellules cancéreuses, y compris la prolifération, l'invasion et la résistance aux agents chimiothérapeutiques. En outre, les cellules RKO-E6 sont utiles dans les études visant à comprendre les réponses cellulaires aux facteurs de stress environnementaux, tels que le stress oxydatif et les agents endommageant l'ADN, qui sont pertinents pour la pathogenèse et la progression du cancer colorectal. Leurs caractéristiques de croissance robustes et leur stabilité génétique en font un modèle précieux pour les essais de criblage à haut débit visant à évaluer l'efficacité de nouveaux composés anticancéreux. En résumé, les cellules RKO-E6 constituent un modèle essentiel pour faire progresser nos connaissances sur la biologie du cancer colorectal et pour développer et tester de nouvelles stratégies thérapeutiques ciblant cette maladie prévalente et souvent mortelle.
Tissu
Colon
Maladie
Carcinome du côlon
Synonymes
  • RKOE6

02Classification

Organisme
Humain
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
2

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale

04Identifiants

Référence
RKO-E6 (numéro de catalogue Cytion 305135)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3787

05Manipulation et culture

Milieu de culture
EMEM (MEM Eagle), w : 2 mM L-Glutamine, w : 2.2 g/L NaHCO3, w : EBSS (numéro d'article Cytion 820100a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS et 1 % de NEAA
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.