Μετάβαση στο περιεχόμενο
RKO-E6
Ιστός
Κόλον
Ασθένεια
Καρκίνωμα του παχέος εντέρου
Συνώνυμα
RKOE6

Έγγραφα

RKO-E6

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305135

RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...

€550.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή
Τα κύτταρα RKO-E6 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκινώματος του παχέος εντέρου που προέρχεται από την κυτταρική σειρά RKO μέσω πρόσθετης μεταλλαξιγένεσης. Τα κύτταρα αυτά χρησιμοποιούνται συνήθως στην έρευνα για τον καρκίνο, με ιδιαίτερη έμφαση στον καρκίνο του παχέος εντέρου. Η παραλλαγή Ε6 της σειράς RKO προσφέρει ένα ξεχωριστό προφίλ που είναι χρήσιμο για την εξέταση των επιδράσεων συγκεκριμένων γενετικών χειρισμών και τη μελέτη των μοριακών μηχανισμών της καρκινογένεσης και της μετάστασης στον καρκίνο του παχέος εντέρου. Τα κύτταρα RKO-E6 χαρακτηρίζονται από διάφορα μοναδικά χαρακτηριστικά, συμπεριλαμβανομένων μεταβολών σε γονίδια που σχετίζονται με τη ρύθμιση του κυτταρικού κύκλου, την απόπτωση και τα μονοπάτια επιδιόρθωσης του DNA. Αυτές οι τροποποιήσεις ενισχύουν τη χρησιμότητα της κυτταρικής σειράς για τη διερεύνηση των βιολογικών επιδράσεων της αποσιώπησης ή της υπερέκφρασης γονιδίων στο πλαίσιο του καρκίνου του παχέος εντέρου. Για παράδειγμα, τα κύτταρα RKO-E6 έχουν χρησιμοποιηθεί για τη μελέτη της επίδρασης των ογκοκατασταλτικών γονιδίων και των ογκογονιδίων στη συμπεριφορά των καρκινικών κυττάρων, συμπεριλαμβανομένου του πολλαπλασιασμού, της διείσδυσης και της αντίστασης σε χημειοθεραπευτικούς παράγοντες. Επιπλέον, τα κύτταρα RKO-E6 είναι χρήσιμα σε μελέτες που αποσκοπούν στην κατανόηση των κυτταρικών αποκρίσεων σε περιβαλλοντικούς στρεσογόνους παράγοντες, όπως το οξειδωτικό στρες και οι παράγοντες που βλάπτουν το DNA, οι οποίοι είναι σχετικοί με την παθογένεια και την εξέλιξη του καρκίνου του παχέος εντέρου. Τα ισχυρά χαρακτηριστικά ανάπτυξης και η γενετική τους σταθερότητα τα καθιστούν πολύτιμο μοντέλο για δοκιμασίες διαλογής υψηλής απόδοσης για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας νέων αντικαρκινικών ενώσεων. Συνοψίζοντας, τα κύτταρα RKO-E6 παρέχουν ένα κρίσιμο μοντέλο για την πρόοδο των γνώσεών μας σχετικά με τη βιολογία του καρκίνου του παχέος εντέρου και για την ανάπτυξη και δοκιμή νέων θεραπευτικών στρατηγικών που στοχεύουν σε αυτή την επικρατούσα και συχνά θανατηφόρα ασθένεια.
Ιστός
Κόλον
Ασθένεια
Καρκίνωμα του παχέος εντέρου
Συνώνυμα
  • RKOE6

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
2

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιακό

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
RKO-E6 (αριθμός καταλόγου Cytion 305135)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_3787

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-γλουταμίνη, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (αριθμός άρθρου Cytion 820100a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS και 1% NEAA
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.