Tartalomra ugrás
RKO-E6
Szövet
Vastagbél
Betegség
Vastagbélrák
Szinonimák
RKOE6

Dokumentumok

RKO-E6

Cell line · Termékszám 305135

RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...

€550.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás
Az RKO-E6 sejtek egy humán kolorektális karcinóma sejtvonal, amely az RKO sejtvonalból származik további mutagenezissel. Ezeket a sejteket gyakran használják a rákkutatásban, különösen a vastagbélrákra összpontosítva. Az RKO-vonal E6-os változata olyan egyedi profillal rendelkezik, amely hasznos a specifikus genetikai manipulációk hatásainak vizsgálatához, valamint a vastagbélrák tumorigenezisének és metasztázisának molekuláris mechanizmusainak tanulmányozásához. Az RKO-E6 sejteket számos egyedi tulajdonság jellemzi, beleértve a sejtciklus szabályozásával, az apoptózissal és a DNS-javító útvonalakkal kapcsolatos gének változását. Ezek a módosítások növelik a sejtvonal hasznosságát a géncsendesítés vagy a gén-túlkifejezés biológiai hatásainak vizsgálatára vastagbélrákos kontextusban. Például az RKO-E6 sejteket alkalmazták a tumorszupresszor gének és onkogének rákos sejtek viselkedésére gyakorolt hatásának tanulmányozására, beleértve a proliferációt, az inváziót és a kemoterápiás szerekkel szembeni rezisztenciát. Az RKO-E6 sejtek továbbá hasznosak a környezeti stresszorokra, például az oxidatív stresszre és a DNS-károsító szerekre adott sejtválaszok megértését célzó vizsgálatokban, amelyek a vastagbélrák patogenezisében és progressziójában fontosak. Robusztus növekedési jellemzőik és genetikai stabilitásuk értékes modellé teszi őket az új rákellenes vegyületek hatékonyságának értékelésére szolgáló nagy áteresztőképességű szűrővizsgálatokhoz. Összefoglalva, az RKO-E6 sejtek kritikus fontosságú modellt jelentenek a vastagbélrák biológiájával kapcsolatos ismereteink bővítéséhez, valamint az új, e gyakori és gyakran halálos betegségre irányuló terápiás stratégiák kifejlesztéséhez és teszteléséhez.
Szövet
Vastagbél
Betegség
Vastagbélrák
Szinonimák
  • RKOE6

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis

04Azonosítók

Hivatkozás
RKO-E6 (Cytion katalógusszám: 305135)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_3787

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.