RKO-E6
Cell line · Productnummer 305135
RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...
Maatwerk / Aanbevelingen
- RKO-E6Cell line€550.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
- RKO-E6-cellen zijn een menselijke colorectaalcarcinoomcellijn die is afgeleid van de RKO-cellijn door middel van extra mutagenese. Deze cellen worden vaak gebruikt in kankeronderzoek, met name gericht op colorectale kanker. De E6-variant van de RKO-cellijn biedt een duidelijk profiel dat nuttig is voor het onderzoeken van de effecten van specifieke genetische manipulaties en het bestuderen van de moleculaire mechanismen van tumorigenese en metastase bij colorectale kanker. RKO-E6-cellen worden gekenmerkt door verschillende unieke eigenschappen, waaronder wijzigingen in genen die verband houden met celcyclusregulatie, apoptose en DNA-herstelpaden. Deze modificaties vergroten de bruikbaarheid van de cellijn voor het onderzoeken van de biologische effecten van het onderdrukken of overexpressie van genen binnen de context van colorectale kanker. RKO-E6 cellen zijn bijvoorbeeld gebruikt om de invloed van tumorsuppressorgenen en oncogenen op het gedrag van kankercellen te bestuderen, waaronder proliferatie, invasie en resistentie tegen chemotherapeutische middelen. Bovendien zijn RKO-E6 cellen nuttig in studies die gericht zijn op het begrijpen van de cellulaire reacties op milieustressoren, zoals oxidatieve stress en DNA-beschadigende middelen, die relevant zijn voor de pathogenese en progressie van colorectale kanker. Door hun robuuste groeikenmerken en genetische stabiliteit zijn ze een waardevol model voor high-throughput screening assays om de werkzaamheid van nieuwe antikankermedicijnen te evalueren. Samengevat bieden RKO-E6 cellen een cruciaal model voor het bevorderen van onze kennis van de biologie van darmkanker en voor het ontwikkelen en testen van nieuwe therapeutische strategieën gericht op deze veel voorkomende en vaak dodelijke ziekte.
- Weefsel
- Kolon
- Ziekte
- Coloncarcinoom
- Synoniemen
- RKOE6
02Classificatie
- Organisme
- Mens
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- GGO-status
- GMO-S1
- Details over de GGO-status
- GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioveiligheidsniveau
- 2
03Kenmerken
- Morfologie
- Epitheel
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- RKO-E6 (Cytion catalogusnummer 305135)
- NCBI-belastingnummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3787
05Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Vloeistofverversing
- 2 tot 3 keer per week
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
07Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja