Премини към съдържанието
RKO-E6
Тъкан
Дебело черво
Заболяване
Карцином на дебелото черво
Синоними
RKOE6

Документи

RKO-E6

Cell line · Номер на продукта 305135

RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...

€550.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание
Клетките RKO-E6 са човешка клетъчна линия на колоректален карцином, получена от клетъчната линия RKO чрез допълнителна мутагенеза. Тези клетки се използват често в изследванията на рака, особено с акцент върху колоректалния рак. Вариантът E6 на линията RKO предлага отличителен профил, който е полезен за изследване на ефектите от специфични генетични манипулации и за изучаване на молекулярните механизми на туморогенезата и метастазите при колоректалния рак. Клетките RKO-E6 се характеризират с няколко уникални характеристики, включително промени в гени, свързани с регулирането на клетъчния цикъл, апоптозата и пътищата за възстановяване на ДНК. Тези модификации повишават полезността на клетъчната линия за изследване на биологичните ефекти от заглушаването или свръхекспресията на гени в контекста на колоректалния рак. Например клетките RKO-E6 са използвани за изследване на влиянието на тумор супресорните гени и онкогените върху поведението на раковите клетки, включително пролиферацията, инвазията и резистентността към химиотерапевтични агенти. Освен това клетките RKO-E6 са полезни при изследвания, насочени към разбиране на клетъчните реакции към стресовите фактори на околната среда, като оксидативен стрес и ДНК-увреждащи агенти, които са от значение за патогенезата и прогресията на колоректалния рак. Техните стабилни характеристики на растеж и генетична стабилност ги превръщат в ценен модел за високопроизводителни скринингови тестове за оценка на ефикасността на нови противоракови съединения. В обобщение, клетките RKO-E6 предоставят важен модел за разширяване на познанията ни за биологията на колоректалния рак и за разработване и тестване на нови терапевтични стратегии, насочени към това широко разпространено и често смъртоносно заболяване.
Тъкан
Дебело черво
Заболяване
Карцином на дебелото черво
Синоними
  • RKOE6

02Класификация

Организъм
Човек
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
2

03Характеристики

Морфология
Епителиален

04Идентификатори

Източник
RKO-E6 (каталожен номер на Cytion 305135)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_3787

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.