Gå direkte til indholdet
RKO-E6
Væv
Tarm
Sygdom
Tyktarms-karcinom
Synonymer
RKOE6

Dokumenter

RKO-E6

Cell line · Varenummer 305135

RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...

€550.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse
RKO-E6-celler er en human kolorektal karcinom-cellelinje, der stammer fra RKO-cellelinjen gennem yderligere mutagenese. Disse celler bruges ofte i kræftforskning, især med fokus på kolorektal kræft. E6-varianten af RKO-cellelinjen har en særlig profil, der er nyttig til at undersøge effekten af specifikke genetiske manipulationer og studere de molekylære mekanismer for tumorigenese og metastase i kolorektal cancer. RKO-E6-celler er kendetegnet ved flere unikke egenskaber, herunder ændringer i gener relateret til cellecyklusregulering, apoptose og DNA-reparationsveje. Disse ændringer forbedrer cellelinjens anvendelighed til at undersøge de biologiske effekter af genlukning eller overudtryk i en kolorektal cancer-sammenhæng. For eksempel er RKO-E6-celler blevet brugt til at undersøge virkningen af tumorsuppressorgener og onkogener på kræftcellers adfærd, herunder spredning, invasion og resistens over for kemoterapeutiske midler. Desuden er RKO-E6-celler nyttige i undersøgelser, der har til formål at forstå de cellulære reaktioner på miljømæssige stressfaktorer, såsom oxidativ stress og DNA-skadelige midler, som er relevante for patogenesen og udviklingen af kolorektal cancer. Deres robuste vækstegenskaber og genetiske stabilitet gør dem til en værdifuld model for high-throughput screeningsassays til evaluering af effekten af nye anticancerforbindelser. Sammenfattende er RKO-E6-celler en kritisk model til at fremme vores viden om kolorektal cancerbiologi og til at udvikle og teste nye terapeutiske strategier rettet mod denne udbredte og ofte dødelige sygdom.
Væv
Tarm
Sygdom
Tyktarms-karcinom
Synonymer
  • RKOE6

02Klassificering

Organisme
Menneske
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
RKO-E6 (Cytion-katalognummer 305135)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_3787

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.