Gå til innholdet
RKO-E6
Vev
Colon
Sykdom
Tykktarmskarsinom
Synonymer
RKOE6

Dokumenter

RKO-E6

Cell line · Produktnummer 305135

RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...

€550.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse
RKO-E6-celler er en human kolorektal karsinomcellelinje som er avledet fra RKO-cellelinjen gjennom ytterligere mutagenese. Disse cellene brukes ofte i kreftforskning, særlig med fokus på kolorektal kreft. E6-varianten av RKO-cellelinjen har en distinkt profil som er nyttig for å undersøke effekten av spesifikke genetiske manipulasjoner og studere de molekylære mekanismene for tumorigenese og metastase i kolorektal kreft. RKO-E6-celler kjennetegnes av flere unike egenskaper, blant annet endringer i gener knyttet til cellesyklusregulering, apoptose og DNA-reparasjonsveier. Disse endringene gjør cellelinjen enda bedre egnet til å undersøke de biologiske effektene av gendemping eller overuttrykk av gener i forbindelse med kolorektal kreft. RKO-E6-celler har for eksempel blitt brukt til å studere virkningen av tumorsuppressorgener og onkogener på kreftcellers atferd, inkludert proliferasjon, invasjon og resistens mot kjemoterapeutiske midler. Videre er RKO-E6-celler nyttige i studier som tar sikte på å forstå cellenes respons på miljømessige stressfaktorer, som oksidativt stress og DNA-skadelige stoffer, som er relevante for patogenesen og utviklingen av kolorektal kreft. De robuste vekstegenskapene og den genetiske stabiliteten gjør dem til en verdifull modell for screeninganalyser med høy gjennomstrømning for å evaluere effekten av nye kreftmedikamenter. RKO-E6-celler er en viktig modell for å øke kunnskapen om biologien bak kolorektal kreft og for å utvikle og teste nye behandlingsstrategier rettet mot denne utbredte og ofte dødelige sykdommen.
Vev
Colon
Sykdom
Tykktarmskarsinom
Synonymer
  • RKOE6

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
RKO-E6 (Cytion-katalognummer 305135)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_3787

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.