Přejít na obsah
RKO-E6
Tkáň
Střeva
Nemoc
Karcinom tlustého střeva
Synonyma
RKOE6

Dokumenty

RKO-E6

Cell line · Číslo výrobku 305135

RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...

€550.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis
Buňky RKO-E6 jsou buněčnou linií lidského kolorektálního karcinomu odvozenou z buněčné linie RKO další mutagenezí. Tyto buňky se běžně používají ve výzkumu rakoviny, zejména se zaměřením na kolorektální karcinom. Varianta E6 linie RKO nabízí odlišný profil, který je užitečný pro zkoumání účinků specifických genetických manipulací a studium molekulárních mechanismů tumorigeneze a metastazování u kolorektálního karcinomu. Buňky RKO-E6 se vyznačují několika jedinečnými vlastnostmi, včetně změn v genech souvisejících s regulací buněčného cyklu, apoptózou a cestami opravy DNA. Tyto modifikace zvyšují užitečnost buněčné linie pro zkoumání biologických účinků umlčení nebo nadměrné exprese genů v kontextu kolorektálního karcinomu. Buňky RKO-E6 byly například použity ke studiu vlivu tumor supresorových genů a onkogenů na chování nádorových buněk, včetně proliferace, invaze a rezistence vůči chemoterapeutickým látkám. Buňky RKO-E6 jsou dále užitečné ve studiích zaměřených na pochopení buněčných reakcí na stresory prostředí, jako je oxidační stres a látky poškozující DNA, které jsou relevantní pro patogenezi a progresi kolorektálního karcinomu. Jejich robustní růstové vlastnosti a genetická stabilita z nich činí cenný model pro vysoce výkonné screeningové testy k hodnocení účinnosti nových protinádorových sloučenin. Souhrnně lze říci, že buňky RKO-E6 představují zásadní model pro prohloubení našich znalostí biologie kolorektálního karcinomu a pro vývoj a testování nových terapeutických strategií zaměřených na toto rozšířené a často smrtelné onemocnění.
Tkáň
Střeva
Nemoc
Karcinom tlustého střeva
Synonyma
  • RKOE6

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové

04Identifikátory

Citace
RKO-E6 (katalogové číslo Cytion 305135)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3787

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.