RKO-E6
Cell line · Toote number 305135
RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...
Kohandamine / Soovitused
- RKO-E6Cell line€550.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
- RKO-E6 rakud on inimese kolorektaalkartsinoomi rakuliin, mis on saadud RKO rakuliinist täiendava mutageneesi teel. Neid rakke kasutatakse tavaliselt vähiuuringutes, keskendudes eelkõige kolorektaalvähile. RKO rakuliini E6 variant pakub eripärast profiili, mis on kasulik konkreetsete geneetiliste manipulatsioonide mõju uurimiseks ning kolorektaalvähi kasvajate tekke ja metastaaside molekulaarmehhanismide uurimiseks. RKO-E6 rakke iseloomustavad mitmed ainulaadsed omadused, sealhulgas muutused rakutsükli regulatsiooni, apoptoosi ja DNA parandamise radadega seotud geenides. Need muutused suurendavad rakuliini kasulikkust geenide vaigistamise või üleekspressiooni bioloogiliste mõjude uurimisel kolorektaalvähi kontekstis. Näiteks on RKO-E6 rakke kasutatud selleks, et uurida kasvajasupressorgeenide ja onkogeenide mõju vähirakkude käitumisele, sealhulgas proliferatsioonile, invasiivsusele ja resistentsusele kemoterapeutiliste ainete suhtes. Lisaks on RKO-E6 rakud kasulikud uuringutes, mille eesmärk on mõista rakkude reaktsiooni keskkonnastressoritele, nagu oksüdatiivne stress ja DNA-d kahjustavad ained, mis on olulised kolorektaalvähi patogeneesi ja progresseerumise seisukohast. RKO-E6 rakud on väärtuslik mudel kõrge läbilaskevõimega sõeltestide jaoks, et hinnata uute vähivastaste ühendite tõhusust. Kokkuvõttes on RKO-E6 rakud kriitiline mudel, mille abil saab edasi arendada teadmisi kolorektaalvähi bioloogiast ning arendada ja katsetada uusi ravistrateegiaid, mis on suunatud selle levinud ja sageli surmaga lõppeva haiguse vastu.
- Kude
- Colon
- Haigus
- Jämesoole kartsinoom
- Sünonüümid
- RKOE6
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Kasvuvõime
- Järgija
- GMO-staatus
- GMO-S1
- GMO-staatuse üksikasjad
- GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloogilise ohutuse tase
- 2
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteel
04Tunnused
- Viide
- RKO-E6 (Cytioni katalooginumber 305135)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3787
05Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
07Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah