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RKO-E6
Tecido
Cólon
Doença
Carcinoma do cólon
Sinónimos
RKOE6

Documentos

RKO-E6

Cell line · Número do produto 305135

RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...

€550.00sem impostos nem portes de envio

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1

01Informações gerais

Descrição
As células RKO-E6 são uma linha celular de carcinoma colorrectal humano derivada da linha celular RKO através de mutagénese adicional. Estas células são habitualmente utilizadas na investigação sobre o cancro, com especial incidência no cancro colorrectal. A variante E6 da linha RKO oferece um perfil distinto que é útil para examinar os efeitos de manipulações genéticas específicas e estudar os mecanismos moleculares da tumorigénese e das metástases no cancro colorrectal. As células RKO-E6 são caracterizadas por várias caraterísticas únicas, incluindo alterações nos genes relacionados com a regulação do ciclo celular, a apoptose e as vias de reparação do ADN. Estas modificações aumentam a utilidade da linha celular para investigar os efeitos biológicos do silenciamento ou sobreexpressão de genes no contexto do cancro colorrectal. Por exemplo, as células RKO-E6 têm sido utilizadas para estudar o impacto dos genes supressores de tumores e dos oncogenes no comportamento das células cancerosas, incluindo a proliferação, a invasão e a resistência aos agentes quimioterapêuticos. Além disso, as células RKO-E6 são úteis em estudos destinados a compreender as respostas celulares a factores de stress ambiental, como o stress oxidativo e os agentes que danificam o ADN, que são relevantes para a patogénese e a progressão do cancro colorrectal. As suas caraterísticas de crescimento robustas e a sua estabilidade genética tornam-nas um modelo valioso para ensaios de rastreio de elevado rendimento destinados a avaliar a eficácia de novos compostos anticancerígenos. Em resumo, as células RKO-E6 constituem um modelo fundamental para o avanço dos nossos conhecimentos sobre a biologia do cancro colorrectal e para o desenvolvimento e teste de novas estratégias terapêuticas dirigidas a esta doença prevalente e frequentemente mortal.
Tecido
Cólon
Doença
Carcinoma do cólon
Sinónimos
  • RKOE6

02Classificação

Organismo
Humano
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
2

03Características

Morfologia
Epitelial

04Identificadores

Referência
RKO-E6 (número de catálogo da Cytion 305135)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3787

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.