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RKO-E6
Pañuelo de papel
Colon
Enfermedad
Carcinoma de colon
Sinónimos
RKOE6

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RKO-E6

Cell line · Número de producto 305135

RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...

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1

01Información general

Descripción
Las células RKO-E6 son una línea celular de carcinoma colorrectal humano derivada de la línea celular RKO mediante mutagénesis adicional. Estas células se utilizan habitualmente en la investigación del cáncer, especialmente en el cáncer colorrectal. La variante E6 de la línea RKO ofrece un perfil distintivo que resulta útil para examinar los efectos de manipulaciones genéticas específicas y estudiar los mecanismos moleculares de la tumorigénesis y la metástasis en el cáncer colorrectal. Las células RKO-E6 se caracterizan por varios rasgos únicos, entre ellos alteraciones en genes relacionados con la regulación del ciclo celular, la apoptosis y las vías de reparación del ADN. Estas modificaciones aumentan la utilidad de la línea celular para investigar los efectos biológicos del silenciamiento o la sobreexpresión de genes en el contexto del cáncer colorrectal. Por ejemplo, las células RKO-E6 se han empleado para estudiar el impacto de los genes supresores de tumores y los oncogenes en el comportamiento de las células cancerosas, incluyendo la proliferación, la invasión y la resistencia a los agentes quimioterapéuticos. Además, las células RKO-E6 son útiles en estudios dirigidos a comprender las respuestas celulares a los factores de estrés ambiental, como el estrés oxidativo y los agentes que dañan el ADN, que son relevantes para la patogénesis y la progresión del cáncer colorrectal. Sus robustas características de crecimiento y su estabilidad genética las convierten en un valioso modelo para ensayos de cribado de alto rendimiento destinados a evaluar la eficacia de nuevos compuestos contra el cáncer. En resumen, las células RKO-E6 constituyen un modelo fundamental para avanzar en el conocimiento de la biología del cáncer colorrectal y para desarrollar y probar nuevas estrategias terapéuticas dirigidas a esta enfermedad prevalente y a menudo mortal.
Pañuelo de papel
Colon
Enfermedad
Carcinoma de colon
Sinónimos
  • RKOE6

02Clasificación

Organismo
Humano
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
2

03Características

Morfología
Epitelial

04Identificadores

Referencia
RKO-E6 (número de catálogo 305135 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3787

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con un 10% de FBS y un 1% de NEAA
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.