RKO-E6
Cell line · Tuotenumero 305135
RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...
Räätälöinti / Suositukset
- RKO-E6Cell line€550.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
- RKO-E6-solut ovat ihmisen kolorektaalikarsinooman solulinja, joka on johdettu RKO-solulinjasta lisämutageenisoimalla. Näitä soluja käytetään yleisesti syöpätutkimuksessa, jossa keskitytään erityisesti paksu- ja peräsuolen syöpään. RKO-linjan E6-muunnos tarjoaa erillisen profiilin, joka on hyödyllinen tiettyjen geneettisten manipulaatioiden vaikutusten tutkimisessa ja paksusuolen syövän kasvainten synnyn ja etäpesäkkeiden molekyylimekanismien tutkimisessa. RKO-E6-soluille on ominaista useita ainutlaatuisia piirteitä, mukaan lukien solusyklin säätelyyn, apoptoosiin ja DNA:n korjautumisreitteihin liittyvien geenien muutokset. Nämä muutokset parantavat solulinjan käyttökelpoisuutta tutkittaessa geenien vaimentamisen tai yli-ilmentämisen biologisia vaikutuksia paksusuolen syövän yhteydessä. RKO-E6-soluja on esimerkiksi käytetty tutkimaan kasvainsuppressorigeenien ja onkogeenien vaikutusta syöpäsolujen käyttäytymiseen, mukaan lukien proliferaatio, invaasio ja resistenssi kemoterapeuttisille aineille. Lisäksi RKO-E6-solut ovat käyttökelpoisia tutkimuksissa, joilla pyritään ymmärtämään solujen reaktioita ympäristöstressitekijöihin, kuten oksidatiiviseen stressiin ja DNA:ta vahingoittaviin aineisiin, jotka ovat merkityksellisiä paksusuolisyövän patogeneesin ja etenemisen kannalta. Niiden vankat kasvuominaisuudet ja geneettinen stabiilisuus tekevät niistä arvokkaan mallin korkean läpimenotehon seulontamäärityksille, joilla arvioidaan uusien syöpäyhdisteiden tehoa. Yhteenvetona voidaan todeta, että RKO-E6-solut ovat ratkaisevan tärkeä malli, jonka avulla voidaan lisätä tietämystä paksusuolen syövän biologiasta ja kehittää ja testata uusia terapeuttisia strategioita, jotka on suunnattu tähän yleiseen ja usein tappavaan sairauteen.
- Kudos
- Paksusuoli
- Sairaus
- Paksusuolen syöpä
- Synonyymit
- RKOE6
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- GMO-status
- GMO-S1
- GMO-statuksen tiedot
- GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioturvallisuustaso
- 2
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteeli
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- RKO-E6 (Cytionin tuotenumero 305135)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3787
05Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
07Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä