RKO-E6
Cell line · Številka izdelka 305135
RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...
Prilagajanje / Priporočila
- RKO-E6Cell line€550.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
- Celice RKO-E6 so celična linija človeškega kolorektalnega karcinoma, pridobljena iz celične linije RKO z dodatno mutagenezo. Te celice se pogosto uporabljajo pri raziskavah raka, zlasti pri kolorektalnem raku. Različica E6 linije RKO ponuja poseben profil, ki je uporaben za preučevanje učinkov posebnih genetskih manipulacij ter preučevanje molekularnih mehanizmov tumorigeneze in metastaziranja pri kolorektalnem raku. Za celice RKO-E6 je značilnih več edinstvenih lastnosti, vključno s spremembami v genih, povezanih z uravnavanjem celičnega cikla, apoptozo in potmi popravljanja DNA. Te spremembe povečujejo uporabnost celične linije za raziskovanje bioloških učinkov utišanja ali prekomernega izražanja genov v okviru kolorektalnega raka. Celice RKO-E6 so bile na primer uporabljene za preučevanje vpliva tumorskih supresorskih genov in onkogenov na obnašanje rakavih celic, vključno s proliferacijo, invazijo in odpornostjo na kemoterapevtike. Poleg tega so celice RKO-E6 uporabne v študijah za razumevanje celičnih odzivov na okoljske stresorje, kot so oksidativni stres in snovi, ki poškodujejo DNA, kar je pomembno za patogenezo in napredovanje kolorektalnega raka. Zaradi svojih robustnih značilnosti rasti in genetske stabilnosti so dragocen model za visoko zmogljive presejalne teste za ocenjevanje učinkovitosti novih protirakavih spojin. Če povzamemo, so celice RKO-E6 pomemben model za izboljšanje našega znanja o biologiji kolorektalnega raka ter za razvoj in preskušanje novih terapevtskih strategij, namenjenih tej razširjeni in pogosto smrtonosni bolezni.
- Tkivo
- Debelo črevo
- Bolezen
- Karcinom debelega črevesa
- Sinonimi
- RKOE6
02Razvrstitev
- Organizem
- Človek
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Status GSO
- GMO-S1
- Podrobnosti o statusu GSO
- GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Stopnja biološke varnosti
- 2
03Značilnosti
- Morfologija
- Epitelijski
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- RKO-E6 (kataloška številka Cytion 305135)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3787
05Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Obnova tekočine
- 2 do 3-krat na teden
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
07Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da