الانتقال إلى المحتوى
RKO-E6
الأنسجة
القولون
المرض
سرطان القولون
المرادفات
RKOE6

المستندات

RKO-E6

Cell line · رقم المنتج 305135

RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف
خلايا RKO-E6 عبارة عن خط خلايا سرطان القولون والمستقيم البشري المشتق من خط خلايا RKO من خلال طفرة إضافية. تُستخدم هذه الخلايا بشكل شائع في أبحاث السرطان، مع التركيز بشكل خاص على سرطان القولون والمستقيم. يوفر المتغير E6 من خط RKO خط خلايا RKO ملفًا مميزًا مفيدًا لفحص تأثيرات التلاعب الجيني المحدد ودراسة الآليات الجزيئية لتكوين الورم والورم الخبيث في سرطان القولون والمستقيم. تتميز خلايا RKO-E6 بالعديد من السمات الفريدة، بما في ذلك التعديلات في الجينات المتعلقة بتنظيم دورة الخلية وموت الخلايا المبرمج ومسارات إصلاح الحمض النووي. تعزز هذه التعديلات فائدة هذا الخط الخلوي في دراسة التأثيرات البيولوجية لإسكات الجينات أو الإفراط في التعبير الجيني في سياق سرطان القولون والمستقيم. على سبيل المثال، تم استخدام خلايا RKO-E6 لدراسة تأثير الجينات الكابتة للورم والجينات المسببة للأورام على سلوك الخلايا السرطانية، بما في ذلك الانتشار والغزو ومقاومة عوامل العلاج الكيميائي. علاوة على ذلك، تُعد خلايا RKO-E6 مفيدة في الدراسات التي تهدف إلى فهم الاستجابات الخلوية للضغوطات البيئية، مثل الإجهاد التأكسدي والعوامل الضارة بالحمض النووي، والتي لها صلة بالتسبب في الإصابة بسرطان القولون والمستقيم وتطوره. كما أن خصائص نموها القوية واستقرارها الوراثي يجعلها نموذجاً قيماً لفحوصات الفحص عالية الإنتاجية لتقييم فعالية المركبات الجديدة المضادة للسرطان. باختصار، توفر خلايا RKO-E6 نموذجاً مهماً لتطوير معرفتنا ببيولوجيا سرطان القولون والمستقيم ولتطوير واختبار استراتيجيات علاجية جديدة تستهدف هذا المرض المنتشر والقاتل في كثير من الأحيان.
الأنسجة
القولون
المرض
سرطان القولون
المرادفات
  • RKOE6

02التصنيف

كائن حي
إنسان
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
2

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة

04المعرّفات

المرجع
RKO-E6 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305135)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_3787

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.