RKO-E6
Cell line · Product number 305135
RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
- תאי RKO-E6 הם קו תאים של קרצינומה קולורקטלית אנושית, שמקורם בקו התאים RKO, באמצעות מוטגנזה נוספת. תאים אלה משמשים בדרך כלל במחקר הסרטן, עם דגש מיוחד על סרטן המעי הגס. הגרסה E6 של קו RKO מציעה פרופיל ייחודי, שימושי לבחינת ההשפעות של מניפולציות גנטיות ספציפיות ולמחקר המנגנונים המולקולריים של התפתחות גידולים וגרורות בסרטן המעי הגס. תאי RKO-E6 מאופיינים בכמה תכונות ייחודיות, כולל שינויים בגנים הקשורים לוויסות מחזור התא, אפופטוזיס ומסלולי תיקון DNA. שינויים אלה משפרים את השימושיות של קו התאים לחקר ההשפעות הביולוגיות של השתקת גנים או ביטוי יתר בהקשר של סרטן המעי הגס. לדוגמה, תאי RKO-E6 שימשו לחקר ההשפעה של גנים מדכאי גידולים ואונקוגנים על התנהגות תאי הסרטן, כולל התרבות, פלישה ועמידות לתרופות כימותרפיות. יתר על כן, תאי RKO-E6 שימושיים במחקרים שמטרתם להבין את התגובות התאיות לגורמי לחץ סביבתיים, כגון לחץ חמצוני וחומרים הפוגעים ב-DNA, הרלוונטיים לפתוגנזה ולהתקדמות של סרטן המעי הגס. מאפייני הצמיחה החזקים והיציבות הגנטית שלהם הופכים אותם למודל חשוב עבור בדיקות סקר בתפוקה גבוהה להערכת היעילות של תרכובות חדשות נגד סרטן. לסיכום, תאי RKO-E6 מספקים מודל קריטי לקידום הידע שלנו על הביולוגיה של סרטן המעי הגס ולפיתוח ובדיקה של אסטרטגיות טיפוליות חדשות המכוונות למחלה נפוצה וקטלנית זו.
- Tissue
- קולון
- Disease
- קרצינומה של המעי הגס
- Synonyms
- RKOE6
02Classification
- Organism
- Human
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- אפיתל
04Identifiers
- Citation
- RKO-E6 (מספר קטלוג של Cytion: 305135)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3787
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes