İçeriğe atla
RKO-E6
Doku
Kolon
Hastalık
Kolon karsinomu
Eş anlamlılar
RKOE6

Belgeler

RKO-E6

Cell line · Ürün numarası 305135

RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...

€550.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama
RKO-E6 hücreleri, ek mutajenez yoluyla RKO hücre hattından türetilen bir insan kolorektal karsinom hücre hattıdır. Bu hücreler, özellikle kolorektal kansere odaklanan kanser araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. RKO hattının E6 varyantı, spesifik genetik manipülasyonların etkilerini incelemek ve kolorektal kanserde tümör oluşumunun ve metastazın moleküler mekanizmalarını incelemek için yararlı olan farklı bir profil sunar. RKO-E6 hücreleri, hücre döngüsü düzenlemesi, apoptoz ve DNA onarım yollarıyla ilgili genlerdeki değişiklikler de dahil olmak üzere çeşitli benzersiz özelliklerle karakterize edilir. Bu değişiklikler, kolorektal kanser bağlamında gen susturma veya aşırı ekspresyonun biyolojik etkilerini araştırmak için hücre hattının faydasını artırır. Örneğin, RKO-E6 hücreleri, tümör baskılayıcı genlerin ve onkogenlerin proliferasyon, invazyon ve kemoterapötik ajanlara direnç dahil olmak üzere kanser hücresi davranışı üzerindeki etkisini incelemek için kullanılmıştır. Ayrıca, RKO-E6 hücreleri, kolorektal kanserin patogenezi ve ilerlemesiyle ilgili olan oksidatif stres ve DNA'ya zarar veren ajanlar gibi çevresel stres faktörlerine karşı hücresel tepkileri anlamayı amaçlayan çalışmalarda yararlıdır. Sağlam büyüme özellikleri ve genetik stabiliteleri, onları yeni antikanser bileşiklerinin etkinliğini değerlendirmek için yüksek verimli tarama deneyleri için değerli bir model haline getirmektedir. Özetle, RKO-E6 hücreleri, kolorektal kanser biyolojisi hakkındaki bilgilerimizi ilerletmek ve bu yaygın ve genellikle ölümcül hastalığı hedef alan yeni terapötik stratejiler geliştirmek ve test etmek için kritik bir model sağlar.
Doku
Kolon
Hastalık
Kolon karsinomu
Eş anlamlılar
  • RKOE6

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
2

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
RKO-E6 (Cytion katalog numarası 305135)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_3787

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.