Prejsť na obsah
RKO-E6
Tkanivo
Colon
Choroba
Karcinóm hrubého čreva
Synonymá
RKOE6

Dokumenty

RKO-E6

Cell line · Číslo výrobku 305135

RKO-E6 cells are a human colorectal carcinoma cell line derived from the RKO cell line through additional mutagenesis. These cells are commonly used in cance...

€550.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis
Bunky RKO-E6 sú bunkovou líniou ľudského kolorektálneho karcinómu odvodenou z bunkovej línie RKO dodatočnou mutagenézou. Tieto bunky sa bežne používajú vo výskume rakoviny, najmä so zameraním na kolorektálny karcinóm. Variant E6 línie RKO ponúka odlišný profil, ktorý je užitočný na skúmanie účinkov špecifických genetických manipulácií a štúdium molekulárnych mechanizmov tumorigenézy a metastázovania pri kolorektálnom karcinóme. Bunky RKO-E6 sa vyznačujú niekoľkými jedinečnými vlastnosťami vrátane zmien v génoch súvisiacich s reguláciou bunkového cyklu, apoptózou a dráhami opravy DNA. Tieto modifikácie zvyšujú využiteľnosť bunkovej línie na skúmanie biologických účinkov utlmenia alebo nadmernej expresie génov v kontexte kolorektálneho karcinómu. Bunky RKO-E6 sa napríklad využívajú na štúdium vplyvu nádorových supresorových génov a onkogénov na správanie rakovinových buniek vrátane proliferácie, invázie a rezistencie na chemoterapeutiká. Bunky RKO-E6 sú okrem toho užitočné v štúdiách zameraných na pochopenie bunkových reakcií na environmentálne stresory, ako je oxidačný stres a látky poškodzujúce DNA, ktoré sú relevantné pre patogenézu a progresiu kolorektálneho karcinómu. Ich robustné rastové charakteristiky a genetická stabilita z nich robia cenný model pre vysoko výkonné skríningové testy na hodnotenie účinnosti nových protinádorových zlúčenín. Celkovo možno povedať, že bunky RKO-E6 predstavujú dôležitý model na rozšírenie našich poznatkov o biológii kolorektálneho karcinómu a na vývoj a testovanie nových terapeutických stratégií zameraných na toto rozšírené a často smrteľné ochorenie.
Tkanivo
Colon
Choroba
Karcinóm hrubého čreva
Synonymá
  • RKOE6

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This human colorectal carcinoma cell line (RKO-E6) contains a plasmid encoding HPV-16 E6 under CMV promoter control, possibly including CMV and HPV-6 sequences, enabling E6-dependent transformation studies. The construct is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové

04Identifikátory

Citácia
RKO-E6 (katalógové číslo Cytion 305135)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3787

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10% FBS a 1% NEAA
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.