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WI 38 VA13 subline 2RA
Tissu
Poumon
Synonymes
WI 38 VA-13 subline 2RA, WI 38VA13 subline 2RA, WI-38 VA13 sub 2 RA, WI38-VA13 subline 2RA, WI38 VA13/2RA, WI38VA13/2RA, VA13 2RA, WI-38 VA13, WI 38 VA 13, WI38-VA13, WI38/VA13, WI38VA13, VA-13, VA13, AG07217, AG7217

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WI 38 VA13 subline 2RA

Cell line · Référence du produit 300421

The WI-38 VA13 subline 2RA, derived from the historic WI-38 cell line originally sourced from the lung tissue of a 3-month-old fetus, represents a key adv...

€430.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
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Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La sous-ligne WI-38 VA13 2RA, dérivée de la lignée cellulaire historique WI-38 provenant à l'origine du tissu pulmonaire d'un fœtus de 3 mois, représente une avancée majeure dans la technologie de la culture cellulaire. La lignée cellulaire WI-38 originale a joué un rôle crucial dans le développement de vaccins contre de nombreuses maladies virales, telles que la rougeole, les oreillons, la rubéole et l'hépatite A. La sous-lignée VA13 2RA est une variante immortalisée de cette lignée cellulaire, obtenue par transformation avec le virus simien 40 (SV40), une pratique courante dans le développement de lignées cellulaires immortelles qui permet une réplication cellulaire indéfinie au-delà du point de sénescence standard d'environ 50 doublements de la population.

L'incorporation du SV40 dans les cellules WI-38 pour créer la sous-lignée VA13 2RA prolonge la durée de vie des cellules, fournissant un modèle plus durable pour les expériences à long terme. Cette transformation conserve les propriétés fondamentales des cellules diploïdes d'origine, mais modifie leur cycle de vie et leur mode de croissance, ce qui permet une croissance soutenue et facilite des études approfondies qui n'étaient pas possibles avec la durée de vie limitée de la lignée cellulaire parentale. La sous-lignée VA13 est donc particulièrement utile dans les domaines de recherche permanents et étendus, notamment la virologie, la pharmacologie et la recherche génétique, où des périodes d'observation prolongées sont nécessaires.

Tissu
Poumon
Synonymes
  • WI 38 VA-13 subline 2RA
  • WI 38VA13 subline 2RA
  • WI-38 VA13 sub 2 RA
  • WI38-VA13 subline 2RA
  • WI38 VA13/2RA
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  • VA13 2RA
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  • WI38/VA13
  • WI38VA13
  • VA-13
  • VA13
  • AG07217
  • AG7217

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
2

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Type de cellule
Fibroblaste
Caryotype
Hyperdiploïde, Nombre modal : 73-78

04Identifiants

Référence
WI 38 VA13 sous-ligne 2RA (numéro de catalogue Cytion 300421)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2759

05Expression et sensibilité

Isoenzymes
G6PD, B
Virus
Contient des papovirus
Sensibilité aux virus
Herpès simplex, stomatite vésiculaire (Indiana), poliovirus 2
Transcriptase inverse
Négatif

06Manipulation et culture

Milieu de culture
EMEM (MEM Eagle), w : 2 mM L-Glutamine, w : 2.2 g/L NaHCO3, w : EBSS (numéro d'article Cytion 820100a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
1 à 2 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 48 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
3 mois de gestation
Origine ethnique
Caucasien

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