İçeriğe atla
WI 38 VA13 subline 2RA
Doku
Akciğer
Eş anlamlılar
WI 38 VA-13 subline 2RA, WI 38VA13 subline 2RA, WI-38 VA13 sub 2 RA, WI38-VA13 subline 2RA, WI38 VA13/2RA, WI38VA13/2RA, VA13 2RA, WI-38 VA13, WI 38 VA 13, WI38-VA13, WI38/VA13, WI38VA13, VA-13, VA13, AG07217, AG7217

WI 38 VA13 subline 2RA

Cell line · Ürün numarası 300421

The WI-38 VA13 subline 2RA, derived from the historic WI-38 cell line originally sourced from the lung tissue of a 3-month-old fetus, represents a key adv...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Başlangıçta 3 aylık bir fetüsün akciğer dokusundan elde edilen tarihi WI-38 hücre hattından türetilen WI-38 VA13 alt hattı 2RA, hücre kültürü teknolojisinde önemli bir ilerlemeyi temsil etmektedir. Orijinal WI-38 hücre hattı kızamık, kabakulak, kızamıkçık ve hepatit A gibi çok sayıda viral hastalık için aşı geliştirilmesinde çok önemliydi. VA13 alt hattı 2RA, bu hücre hattının Simian Virüs 40 (SV40) ile transformasyon yoluyla elde edilen ölümsüzleştirilmiş bir varyantıdır; bu, ölümsüz hücre hatlarının geliştirilmesinde yaygın olan ve yaklaşık 50 popülasyon ikiye katlama standart yaşlanma noktasının ötesinde süresiz hücre replikasyonuna izin veren bir uygulamadır.

VA13 alt hattı 2RA'yı oluşturmak için SV40'ın WI-38 hücrelerine dahil edilmesi, hücrelerin ömrünü uzatarak uzun vadeli deneyler için daha dayanıklı bir model sağlar. Bu dönüşüm, orijinal diploid hücrelerin temel özelliklerini korur ancak yaşam döngülerini ve büyüme modellerini değiştirerek sürekli büyümeyi sağlar ve ana hücre hattının sınırlı ömrü ile mümkün olmayan kapsamlı çalışmaları kolaylaştırır. Bu da VA13 alt hattını, uzun gözlem sürelerinin gerekli olduğu viroloji, farmakoloji ve genetik araştırmalar gibi devam eden ve kapsamlı araştırma alanlarında özellikle faydalı kılmaktadır.

Doku
Akciğer
Eş anlamlılar
  • WI 38 VA-13 subline 2RA
  • WI 38VA13 subline 2RA
  • WI-38 VA13 sub 2 RA
  • WI38-VA13 subline 2RA
  • WI38 VA13/2RA
  • WI38VA13/2RA
  • VA13 2RA
  • WI-38 VA13
  • WI 38 VA 13
  • WI38-VA13
  • WI38/VA13
  • WI38VA13
  • VA-13
  • VA13
  • AG07217
  • AG7217

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
2

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Hücre türü
Fibroblast
Karyotip
Hiperdiploid, Modal sayı: 73-78

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
WI 38 VA13 alt hattı 2RA (Cytion katalog numarası 300421)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_2759

05İfade ve duyarlılık

İzoenzimler
G6PD, B
Virüsler
Papovavirüs içerir
Virüse karşı duyarlılık
Herpes simpleks, veziküler stomatit (Indiana), poliovirüs 2
Ters transkriptaz
Negatif

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 1 ila 2 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 48 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
3 aylık gebelik
Etnik köken
Kafkas

Ayrıca şunlara da ihtiyacınız olabilir