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WI 38 VA13 subline 2RA
Tessuto
Polmone
Sinonimi
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WI 38 VA13 subline 2RA

Cell line · Codice prodotto 300421

The WI-38 VA13 subline 2RA, derived from the historic WI-38 cell line originally sourced from the lung tissue of a 3-month-old fetus, represents a key adv...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
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1

01Informazioni generali

Descrizione

La sublinea 2RA WI-38 VA13, derivata dalla storica linea cellulare WI-38 originariamente ricavata dal tessuto polmonare di un feto di 3 mesi, rappresenta un progresso fondamentale nella tecnologia delle colture cellulari. La linea cellulare WI-38 originale è stata fondamentale per lo sviluppo di vaccini per numerose malattie virali, come il morbillo, la parotite, la rosolia e l'epatite A. La sublinea VA13 2RA è una variante immortalizzata di questa linea cellulare, ottenuta attraverso la trasformazione con il Simian Virus 40 (SV40), una pratica comune nello sviluppo di linee cellulari immortali che consente una replicazione cellulare indefinita oltre il punto di senescenza standard di circa 50 raddoppi di popolazione.

L'incorporazione dell'SV40 nelle cellule WI-38 per creare la sublinea VA13 2RA estende la durata di vita delle cellule, fornendo un modello più duraturo per esperimenti a lungo termine. Questa trasformazione mantiene le proprietà fondamentali delle cellule diploidi originali, ma ne altera il ciclo di vita e i modelli di crescita, consentendo una crescita sostenuta e facilitando studi approfonditi che non erano possibili con la durata limitata della linea cellulare madre. Ciò rende la sublinea VA13 particolarmente utile in aree di ricerca estese e in corso, tra cui la virologia, la farmacologia e la ricerca genetica, dove sono necessari periodi di osservazione prolungati.

Tessuto
Polmone
Sinonimi
  • WI 38 VA-13 subline 2RA
  • WI 38VA13 subline 2RA
  • WI-38 VA13 sub 2 RA
  • WI38-VA13 subline 2RA
  • WI38 VA13/2RA
  • WI38VA13/2RA
  • VA13 2RA
  • WI-38 VA13
  • WI 38 VA 13
  • WI38-VA13
  • WI38/VA13
  • WI38VA13
  • VA-13
  • VA13
  • AG07217
  • AG7217

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Fibroblasti
Cariotipo
Iperdiploide, numero modale: 73-78

04Identificatori

Riferimento bibliografico
WI 38 VA13 sublinea 2RA (numero di catalogo Cytion 300421)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2759

05Espressione e suscettibilità

Isoenzimi
G6PD, B
Virus
Contiene Papovavirus
Suscettibilità ai virus
Herpes simplex, stomatite vescicolare (Indiana), poliovirus 2
Trascriptasi inversa
Negativo

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 1 a 2 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 48 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
3 mesi di gestazione
Etnia
Caucasico