Tartalomra ugrás
WI 38 VA13 subline 2RA
Szövet
Tüdő
Szinonimák
WI 38 VA-13 subline 2RA, WI 38VA13 subline 2RA, WI-38 VA13 sub 2 RA, WI38-VA13 subline 2RA, WI38 VA13/2RA, WI38VA13/2RA, VA13 2RA, WI-38 VA13, WI 38 VA 13, WI38-VA13, WI38/VA13, WI38VA13, VA-13, VA13, AG07217, AG7217

Dokumentumok

WI 38 VA13 subline 2RA

Cell line · Termékszám 300421

The WI-38 VA13 subline 2RA, derived from the historic WI-38 cell line originally sourced from the lung tissue of a 3-month-old fetus, represents a key adv...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A WI-38 VA13 2RA alvonal, amely az eredetileg egy 3 hónapos magzat tüdőszövetéből származó történelmi WI-38 sejtvonalból származik, kulcsfontosságú előrelépést jelent a sejttenyésztési technológiában. Az eredeti WI-38 sejtvonal kulcsfontosságú volt számos vírusos betegség, például a kanyaró, a mumpsz, a rubeola és a hepatitis A elleni vakcinák kifejlesztésében. A VA13 2RA alvonal ennek a sejtvonalnak egy immortalizált változata, amelyet a Simian Virus 40 (SV40) vírussal történő transzformációval értek el, ami a halhatatlan sejtvonalak kifejlesztése során bevett gyakorlat, amely lehetővé teszi a sejtek korlátlan szaporodását a standard szeneszcenciaponton (kb. 50 populációs duplázódás) túl.

Az SV40 beépítése a WI-38 sejtekbe a VA13 2RA alvonal létrehozásához meghosszabbítja a sejtek élettartamát, így tartósabb modellt biztosít a hosszú távú kísérletekhez. Ez az átalakítás megőrzi az eredeti diploid sejtek alapvető tulajdonságait, de megváltoztatja életciklusukat és növekedési mintázatukat, lehetővé téve a tartós növekedést és megkönnyítve olyan kiterjedt vizsgálatokat, amelyek az anyasejtvonal véges élettartama mellett nem voltak lehetségesek. Ez teszi a VA13 alvonalat különösen hasznossá a folyamatban lévő és kiterjedt kutatási területeken, beleértve a virológiát, a farmakológiát és a genetikai kutatásokat, ahol hosszabb megfigyelési időszakokra van szükség.

Szövet
Tüdő
Szinonimák
  • WI 38 VA-13 subline 2RA
  • WI 38VA13 subline 2RA
  • WI-38 VA13 sub 2 RA
  • WI38-VA13 subline 2RA
  • WI38 VA13/2RA
  • WI38VA13/2RA
  • VA13 2RA
  • WI-38 VA13
  • WI 38 VA 13
  • WI38-VA13
  • WI38/VA13
  • WI38VA13
  • VA-13
  • VA13
  • AG07217
  • AG7217

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Fibroblasztok
Kariotípus
Hiperdiploid, Modális szám: 73-78

04Azonosítók

Hivatkozás
WI 38 VA13 2RA alvonal (Cytion katalógusszám: 300421)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_2759

05Kifejeződés és fogékonyság

Izoenzimek
G6PD, B
Vírusok
Papovavírust tartalmaz
Vírusérzékenység
Herpes simplex, hólyagos szájgyulladás (Indiana), gyermekbénulás vírus 2
Fordított transzkriptáz
Negatív

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 1-2 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel a lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felépüljenek a fagyasztási folyamatból, és legalább 48 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
3 hónapos terhesség
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi