Prejsť na obsah
WI 38 VA13 subline 2RA
Tkanivo
Pľúca
Synonymá
WI 38 VA-13 subline 2RA, WI 38VA13 subline 2RA, WI-38 VA13 sub 2 RA, WI38-VA13 subline 2RA, WI38 VA13/2RA, WI38VA13/2RA, VA13 2RA, WI-38 VA13, WI 38 VA 13, WI38-VA13, WI38/VA13, WI38VA13, VA-13, VA13, AG07217, AG7217

Dokumenty

WI 38 VA13 subline 2RA

Cell line · Číslo výrobku 300421

The WI-38 VA13 subline 2RA, derived from the historic WI-38 cell line originally sourced from the lung tissue of a 3-month-old fetus, represents a key adv...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Podlínia WI-38 VA13 2RA, odvodená od historickej bunkovej línie WI-38, ktorá pôvodne pochádzala z pľúcneho tkaniva 3-mesačného plodu, predstavuje kľúčový pokrok v technológii bunkových kultúr. Pôvodná bunková línia WI-38 mala zásadný význam pri vývoji vakcín proti mnohým vírusovým ochoreniam, ako sú osýpky, mumps, ružienka a hepatitída A. Sublínia VA13 2RA je imortalizovaným variantom tejto bunkovej línie, ktorý sa dosiahol transformáciou pomocou vírusu Simian Virus 40 (SV40), čo je postup bežný pri vývoji nesmrteľných bunkových línií, ktorý umožňuje neobmedzenú replikáciu buniek po štandardnom bode senescencie približne 50 zdvojení populácie.

Inkorporácia SV40 do buniek WI-38 s cieľom vytvoriť sublíniu VA13 2RA predlžuje životnosť buniek, čím poskytuje odolnejší model pre dlhodobé experimenty. Táto transformácia zachováva základné vlastnosti pôvodných diploidných buniek, ale mení ich životný cyklus a rastové vzorce, čo umožňuje trvalý rast a uľahčuje rozsiahle štúdie, ktoré neboli možné pri obmedzenej životnosti materskej bunkovej línie. Vďaka tomu je sublínia VA13 obzvlášť užitočná v prebiehajúcich a rozsiahlych oblastiach výskumu vrátane virológie, farmakológie a genetického výskumu, kde je potrebné dlhšie obdobie pozorovania.

Tkanivo
Pľúca
Synonymá
  • WI 38 VA-13 subline 2RA
  • WI 38VA13 subline 2RA
  • WI-38 VA13 sub 2 RA
  • WI38-VA13 subline 2RA
  • WI38 VA13/2RA
  • WI38VA13/2RA
  • VA13 2RA
  • WI-38 VA13
  • WI 38 VA 13
  • WI38-VA13
  • WI38/VA13
  • WI38VA13
  • VA-13
  • VA13
  • AG07217
  • AG7217

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Fibroblasty
Karyotyp
Hyperdiploidný, modálne číslo: 73-78

04Identifikátory

Citácia
WI 38 VA13 subline 2RA (katalógové číslo Cytion 300421)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2759

05Prejav a náchylnosť

Izoenzýmy
G6PD, B
Vírusy
Obsahuje papovavírus
Náchylnosť na vírusy
Herpes simplex, vezikulárna stomatitída (Indiana), poliovírus 2
Reverzná transkriptáza
Negatívne

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
1 až 2-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v množstve 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilepiť sa najmenej 48 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
3 mesiace tehotenstva
Etnická príslušnosť
Kaukazský