Skip to content
WI 38 VA13 subline 2RA
Tissue
ปอด
Synonyms
WI 38 VA-13 subline 2RA, WI 38VA13 subline 2RA, WI-38 VA13 sub 2 RA, WI38-VA13 subline 2RA, WI38 VA13/2RA, WI38VA13/2RA, VA13 2RA, WI-38 VA13, WI 38 VA 13, WI38-VA13, WI38/VA13, WI38VA13, VA-13, VA13, AG07217, AG7217

Documents

WI 38 VA13 subline 2RA

Cell line · Product number 300421

The WI-38 VA13 subline 2RA, derived from the historic WI-38 cell line originally sourced from the lung tissue of a 3-month-old fetus, represents a key adv...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

WI-38 VA13 subline 2RA ซึ่งสืบทอดมาจากสายเซลล์ WI-38 ที่มีประวัติยาวนานและได้มาจากเนื้อเยื่อปอดของทารกในครรภ์อายุ 3 เดือน ถือเป็นความก้าวหน้าสำคัญในเทคโนโลยีการเพาะเลี้ยงเซลล์ สายเซลล์ WI-38 ดั้งเดิมมีบทบาทสำคัญอย่างยิ่งในการพัฒนาวัคซีนสำหรับโรคไวรัสหลายชนิด เช่น หัด คางทูม หัดเยอรมัน และไวรัสตับอักเสบเอVA13 subline 2RA เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่ถูกทำให้เป็นอมตะของเซลล์ไลน์นี้ ซึ่งได้มาจากการแปลงสภาพด้วยไวรัสลิงซิมิアン 40 (SV40) ซึ่งเป็นวิธีที่ใช้กันทั่วไปในการพัฒนาเซลล์ไลน์ที่เป็นอมตะ ซึ่งช่วยให้เซลล์สามารถแบ่งตัวได้อย่างไม่จำกัดเกินจุดเสื่อมสภาพตามธรรมชาติที่ประมาณ 50 รอบการแบ่งตัว

การนำ SV40 เข้าสู่เซลล์ WI-38 เพื่อสร้างสายพันธุ์ย่อย VA13 2RA ช่วยยืดอายุการใช้งานของเซลล์ ทำให้เป็นแบบจำลองที่ทนทานมากขึ้นสำหรับการทดลองระยะยาวการเปลี่ยนแปลงนี้ยังคงรักษาคุณสมบัติพื้นฐานของเซลล์ไดพลอยด์ดั้งเดิมไว้ แต่เปลี่ยนแปลงวงจรชีวิตและรูปแบบการเจริญเติบโต ทำให้สามารถเจริญเติบโตได้อย่างต่อเนื่องและเอื้อต่อการศึกษาวิจัยอย่างกว้างขวางซึ่งไม่สามารถทำได้ด้วยเซลล์ไลน์ต้นกำเนิดที่มีอายุจำกัด สิ่งนี้ทำให้ VA13 ซับไลน์มีประโยชน์อย่างยิ่งในงานวิจัยที่กำลังดำเนินอยู่และครอบคลุมหลายด้าน รวมถึงไวรัสวิทยา เภสัชวิทยา และวิจัยทางพันธุกรรม ซึ่งจำเป็นต้องมีการสังเกตการณ์เป็นระยะเวลานาน

Tissue
ปอด
Synonyms
  • WI 38 VA-13 subline 2RA
  • WI 38VA13 subline 2RA
  • WI-38 VA13 sub 2 RA
  • WI38-VA13 subline 2RA
  • WI38 VA13/2RA
  • WI38VA13/2RA
  • VA13 2RA
  • WI-38 VA13
  • WI 38 VA 13
  • WI38-VA13
  • WI38/VA13
  • WI38VA13
  • VA-13
  • VA13
  • AG07217
  • AG7217

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
ไฟโบรบลาสต์
Karyotype
ไฮเปอร์ไดพลอยด์, จำนวนแบบโมดัล: 73-78

04Identifiers

Citation
WI 38 VA13 ซับไลน์ 2RA (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300421)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2759

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
จี6พีดี, บี
Viruses
มีพาโพไวรัส
Virus susceptibility
เริม, โรคปากและปากเปื่อย (อินเดียนา), โปลิโอไวรัส 2
Reverse transcriptase
เชิงลบ

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
1 ถึง 2 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเลี้ยงเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์/ซม. และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 48 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
ตั้งครรภ์ได้ 3 เดือน
Ethnicity
คอเคเชียน