
- Væv
- Lunge
- Synonymer
- WI 38 VA-13 subline 2RA, WI 38VA13 subline 2RA, WI-38 VA13 sub 2 RA, WI38-VA13 subline 2RA, WI38 VA13/2RA, WI38VA13/2RA, VA13 2RA, WI-38 VA13, WI 38 VA 13, WI38-VA13, WI38/VA13, WI38VA13, VA-13, VA13, AG07217, AG7217
Dokumenter
WI 38 VA13 subline 2RA
Cell line · Varenummer 300421
The WI-38 VA13 subline 2RA, derived from the historic WI-38 cell line originally sourced from the lung tissue of a 3-month-old fetus, represents a key adv...
Tilpasning / Anbefalinger
- WI 38 VA13 subline 2RACell line€430.00
Anbefalet (det nyeste parti)
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
WI-38 VA13 subline 2RA, der stammer fra den historiske WI-38-cellelinje, som oprindeligt kom fra lungevæv fra et 3 måneder gammelt foster, repræsenterer et vigtigt fremskridt inden for cellekulturteknologi. Den oprindelige WI-38-cellelinje var afgørende for udviklingen af vacciner mod adskillige virussygdomme, såsom mæslinger, fåresyge, røde hunde og hepatitis A. VA13-sublinjen 2RA er en udødeliggjort variant af denne cellelinje, opnået gennem transformation med Simian Virus 40 (SV40), en praksis, der er almindelig i udviklingen af udødelige cellelinjer, som giver mulighed for ubegrænset cellereplikation ud over standardsenescenspunktet på ca. 50 populationsfordoblinger.
Inkorporeringen af SV40 i WI-38-cellerne for at skabe VA13-underlinjen 2RA forlænger cellernes levetid og giver en mere holdbar model til langtidseksperimenter. Denne transformation bevarer de oprindelige diploide cellers grundlæggende egenskaber, men ændrer deres livscyklus og vækstmønstre, hvilket muliggør vedvarende vækst og omfattende undersøgelser, som ikke var mulige med modercellelinjens begrænsede levetid. Det gør VA13-underlinjen særligt nyttig i igangværende og omfattende forskningsområder, herunder virologi, farmakologi og genetisk forskning, hvor det er nødvendigt med længerevarende observationsperioder.
- Væv
- Lunge
- Synonymer
- WI 38 VA-13 subline 2RA
- WI 38VA13 subline 2RA
- WI-38 VA13 sub 2 RA
- WI38-VA13 subline 2RA
- WI38 VA13/2RA
- WI38VA13/2RA
- VA13 2RA
- WI-38 VA13
- WI 38 VA 13
- WI38-VA13
- WI38/VA13
- WI38VA13
- VA-13
- VA13
- AG07217
- AG7217
02Klassificering
- Organisme
- Menneske
- Køn
- Kvinde
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- Biosikkerhedsniveau
- 2
03Egenskaber
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Celletype
- Fibroblast
- Karyotype
- Hyperdiploid, modaltal: 73-78
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- WI 38 VA13 subline 2RA (Cytion katalognummer 300421)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2759
05Udtryk og modtagelighed
- Isoenzymer
- G6PD, B
- Vira
- Indeholder papovavirus
- Virusfølsomhed
- Herpes simplex, vesikulær stomatitis (Indiana), poliovirus 2
- Revers transkriptase
- Negativ
06Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 10% FBS
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
- Såtæthed
- 1 x 104 celler/cm2
- Væskeudskiftning
- 1 til 2 gange om ugen
- Genopretning efter optøning
- Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 48 timer.
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
08Donor
- Donorens alder
- 3 måneders drægtighed
- Etnisk tilhørsforhold
- Kaukasisk
09Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der kræves en aftale om overførsel af materiale
- Ja
