Ga naar de inhoud
WI 38 VA13 subline 2RA
Weefsel
Long
Synoniemen
WI 38 VA-13 subline 2RA, WI 38VA13 subline 2RA, WI-38 VA13 sub 2 RA, WI38-VA13 subline 2RA, WI38 VA13/2RA, WI38VA13/2RA, VA13 2RA, WI-38 VA13, WI 38 VA 13, WI38-VA13, WI38/VA13, WI38VA13, VA-13, VA13, AG07217, AG7217

Documenten

WI 38 VA13 subline 2RA

Cell line · Productnummer 300421

The WI-38 VA13 subline 2RA, derived from the historic WI-38 cell line originally sourced from the lung tissue of a 3-month-old fetus, represents a key adv...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De WI-38 VA13 sublijn 2RA, afgeleid van de historische WI-38 cellijn die oorspronkelijk afkomstig was van het longweefsel van een 3 maanden oude foetus, vertegenwoordigt een belangrijke vooruitgang in de celkweektechnologie. De oorspronkelijke WI-38 cellijn was van cruciaal belang bij de ontwikkeling van vaccins voor tal van virusziekten, zoals mazelen, bof, rode hond en hepatitis A. De VA13 sublijn 2RA is een geïmmortaliseerde variant van deze cellijn, verkregen door transformatie met het Simian Virus 40 (SV40), een praktijk die gebruikelijk is bij de ontwikkeling van immortale cellijnen die onbepaalde celreplicatie mogelijk maakt voorbij het standaard senescentiepunt van ongeveer 50 populatieverdubbelingen.

De incorporatie van SV40 in de WI-38 cellen om de VA13 sublijn 2RA te creëren verlengt de levensduur van de cellen, waardoor een duurzamer model ontstaat voor langetermijnexperimenten. Deze transformatie behoudt de fundamentele eigenschappen van de oorspronkelijke diploïde cellen, maar verandert hun levenscyclus en groeipatronen, waardoor duurzame groei mogelijk wordt en uitgebreide studies kunnen worden uitgevoerd die niet mogelijk waren met de eindige levensduur van de oudercellijn. Dit maakt de VA13-sublijn bijzonder nuttig in lopende en uitgebreide onderzoeksgebieden, waaronder virologie, farmacologie en genetisch onderzoek, waar langere observatieperioden nodig zijn.

Weefsel
Long
Synoniemen
  • WI 38 VA-13 subline 2RA
  • WI 38VA13 subline 2RA
  • WI-38 VA13 sub 2 RA
  • WI38-VA13 subline 2RA
  • WI38 VA13/2RA
  • WI38VA13/2RA
  • VA13 2RA
  • WI-38 VA13
  • WI 38 VA 13
  • WI38-VA13
  • WI38/VA13
  • WI38VA13
  • VA-13
  • VA13
  • AG07217
  • AG7217

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Fibroblast
Karyotype
Hyperdiploïd, Modaal aantal: 73-78

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
WI 38 VA13 sublijn 2RA (Cytion catalogusnummer 300421)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2759

05Expressie en vatbaarheid

Iso-enzymen
G6PD, B
Virussen
Bevat Papovavirus
Gevoeligheid voor virussen
Herpes simplex, vesiculaire stomatitis (Indiana), poliovirus 2
Reverse transcriptase
Negatief

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
1 tot 2 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, zaai de cellen uit op 5 x 104 cellen/cm2 en laat de cellen minstens 48 uur herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
3 maanden zwangerschap
Etnische afkomst
Kaukasisch