Премини към съдържанието
WI 38 VA13 subline 2RA
Тъкан
Бял дроб
Синоними
WI 38 VA-13 subline 2RA, WI 38VA13 subline 2RA, WI-38 VA13 sub 2 RA, WI38-VA13 subline 2RA, WI38 VA13/2RA, WI38VA13/2RA, VA13 2RA, WI-38 VA13, WI 38 VA 13, WI38-VA13, WI38/VA13, WI38VA13, VA-13, VA13, AG07217, AG7217

Документи

WI 38 VA13 subline 2RA

Cell line · Номер на продукта 300421

The WI-38 VA13 subline 2RA, derived from the historic WI-38 cell line originally sourced from the lung tissue of a 3-month-old fetus, represents a key adv...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Подлинията WI-38 VA13 2RA, получена от историческата клетъчна линия WI-38, първоначално получена от белодробна тъкан на 3-месечен плод, представлява ключов напредък в технологията за клетъчни култури. Оригиналната клетъчна линия WI-38 е от решаващо значение за разработването на ваксини за многобройни вирусни заболявания, като морбили, паротит, рубеола и хепатит А. Подлинията VA13 2RA е имортализиран вариант на тази клетъчна линия, постигнат чрез трансформация с вирус Simian 40 (SV40) - практика, разпространена при разработването на безсмъртни клетъчни линии, която позволява неограничена клетъчна репликация отвъд стандартната точка на стареене от около 50 удвоявания на популацията.

Включването на SV40 в клетките WI-38 за създаване на подлинията VA13 2RA удължава живота на клетките, осигурявайки по-устойчив модел за дългосрочни експерименти. Тази трансформация запазва основните свойства на оригиналните диплоидни клетки, но променя техния жизнен цикъл и модели на растеж, като позволява устойчив растеж и улеснява обширни изследвания, които не са били възможни при ограничената продължителност на живота на изходната клетъчна линия. Това прави подлинията VA13 особено полезна в текущи и обширни изследователски области, включително вирусология, фармакология и генетични изследвания, където са необходими продължителни периоди на наблюдение.

Тъкан
Бял дроб
Синоними
  • WI 38 VA-13 subline 2RA
  • WI 38VA13 subline 2RA
  • WI-38 VA13 sub 2 RA
  • WI38-VA13 subline 2RA
  • WI38 VA13/2RA
  • WI38VA13/2RA
  • VA13 2RA
  • WI-38 VA13
  • WI 38 VA 13
  • WI38-VA13
  • WI38/VA13
  • WI38VA13
  • VA-13
  • VA13
  • AG07217
  • AG7217

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
2

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Фибробласти
Кариотип
Хипердиплоиден, модален номер: 73-78

04Идентификатори

Източник
WI 38 VA13 подлиния 2RA (каталожен номер 300421 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_2759

05Проява и предразположеност

Изоензими
G6PD, B
Вируси
Съдържа паповавирус
Податливост към вируси
Херпес симплекс, везикуларен стоматит (Индиана), полиовирус 2
Обратна транскриптаза
Отрицателен

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
1 до 2 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, разположете клетките на 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за поне 48 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
3 месеца бременност
Етническа принадлежност
Кавказки

Може да ви е необходимо също