Pereiti prie turinio
WI 38 VA13 subline 2RA
Audinys
Plaučiai
Sinonimai
WI 38 VA-13 subline 2RA, WI 38VA13 subline 2RA, WI-38 VA13 sub 2 RA, WI38-VA13 subline 2RA, WI38 VA13/2RA, WI38VA13/2RA, VA13 2RA, WI-38 VA13, WI 38 VA 13, WI38-VA13, WI38/VA13, WI38VA13, VA-13, VA13, AG07217, AG7217

Dokumentai

WI 38 VA13 subline 2RA

Cell line · Prekės numeris 300421

The WI-38 VA13 subline 2RA, derived from the historic WI-38 cell line originally sourced from the lung tissue of a 3-month-old fetus, represents a key adv...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

WI-38 VA13 sublinija 2RA, išvesta iš istorinės WI-38 ląstelių linijos, iš pradžių gautos iš 3 mėnesių amžiaus vaisiaus plaučių audinio, yra esminis ląstelių kultūrų technologijos pasiekimas. Originali WI-38 ląstelių linija buvo labai svarbi kuriant vakcinas nuo daugelio virusinių ligų, pavyzdžiui, tymų, kiaulytės, raudonukės ir hepatito A. VA13 sublinija 2RA yra nemortizuotas šios ląstelių linijos variantas, gautas transformuojant ją Simian Virus 40 (SV40) virusu - tai įprasta nemirtingų ląstelių linijų kūrimo praktika, leidžianti neribotą ląstelių replikaciją, viršijančią standartinį senėjimo tašką - maždaug 50 populiacijos padvigubėjimų.

SV40 įterpimas į WI-38 ląsteles, kad būtų sukurta VA13 sublinija 2RA, prailgina ląstelių gyvavimo trukmę, todėl jos tampa patvaresniu modeliu ilgalaikiams eksperimentams. Ši transformacija išlaiko pagrindines pradinių diploidinių ląstelių savybes, tačiau pakeičia jų gyvenimo ciklą ir augimo modelius, todėl jos gali nuolat augti ir palengvina išsamius tyrimus, kurie buvo neįmanomi dėl ribotos pradinės ląstelių linijos gyvavimo trukmės. Dėl to VA13 sublinija ypač naudinga tęstinių ir plataus masto tyrimų srityse, įskaitant virusologiją, farmakologiją ir genetinius tyrimus, kur reikia ilgesnių stebėjimo laikotarpių.

Audinys
Plaučiai
Sinonimai
  • WI 38 VA-13 subline 2RA
  • WI 38VA13 subline 2RA
  • WI-38 VA13 sub 2 RA
  • WI38-VA13 subline 2RA
  • WI38 VA13/2RA
  • WI38VA13/2RA
  • VA13 2RA
  • WI-38 VA13
  • WI 38 VA 13
  • WI38-VA13
  • WI38/VA13
  • WI38VA13
  • VA-13
  • VA13
  • AG07217
  • AG7217

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Ląstelių tipas
Fibroblastai
Kariotipas
Hiperdiploidinis, Modalinis skaičius: 73-78

04Identifikatoriai

Nuoroda
WI 38 VA13 sublinija 2RA (Cytion katalogo numeris 300421)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_2759

05Išraiška ir jautrumas

Izofermentai
G6PD, B
Virusai
Sudėtyje yra papovaviruso
Jautrumas virusams
Paprastoji pūslelinė, vezikulinis stomatitas (Indiana), poliovirusas 2
Atvirkštinė transkriptazė
Neigiamas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
1-2 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 48 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
3 nėštumo mėnesiai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių