
- Audinys
- Plaučiai
- Sinonimai
- WI 38 VA-13 subline 2RA, WI 38VA13 subline 2RA, WI-38 VA13 sub 2 RA, WI38-VA13 subline 2RA, WI38 VA13/2RA, WI38VA13/2RA, VA13 2RA, WI-38 VA13, WI 38 VA 13, WI38-VA13, WI38/VA13, WI38VA13, VA-13, VA13, AG07217, AG7217
Dokumentai
WI 38 VA13 subline 2RA
Cell line · Prekės numeris 300421
The WI-38 VA13 subline 2RA, derived from the historic WI-38 cell line originally sourced from the lung tissue of a 3-month-old fetus, represents a key adv...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- WI 38 VA13 subline 2RACell line€430.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
WI-38 VA13 sublinija 2RA, išvesta iš istorinės WI-38 ląstelių linijos, iš pradžių gautos iš 3 mėnesių amžiaus vaisiaus plaučių audinio, yra esminis ląstelių kultūrų technologijos pasiekimas. Originali WI-38 ląstelių linija buvo labai svarbi kuriant vakcinas nuo daugelio virusinių ligų, pavyzdžiui, tymų, kiaulytės, raudonukės ir hepatito A. VA13 sublinija 2RA yra nemortizuotas šios ląstelių linijos variantas, gautas transformuojant ją Simian Virus 40 (SV40) virusu - tai įprasta nemirtingų ląstelių linijų kūrimo praktika, leidžianti neribotą ląstelių replikaciją, viršijančią standartinį senėjimo tašką - maždaug 50 populiacijos padvigubėjimų.
SV40 įterpimas į WI-38 ląsteles, kad būtų sukurta VA13 sublinija 2RA, prailgina ląstelių gyvavimo trukmę, todėl jos tampa patvaresniu modeliu ilgalaikiams eksperimentams. Ši transformacija išlaiko pagrindines pradinių diploidinių ląstelių savybes, tačiau pakeičia jų gyvenimo ciklą ir augimo modelius, todėl jos gali nuolat augti ir palengvina išsamius tyrimus, kurie buvo neįmanomi dėl ribotos pradinės ląstelių linijos gyvavimo trukmės. Dėl to VA13 sublinija ypač naudinga tęstinių ir plataus masto tyrimų srityse, įskaitant virusologiją, farmakologiją ir genetinius tyrimus, kur reikia ilgesnių stebėjimo laikotarpių.
- Audinys
- Plaučiai
- Sinonimai
- WI 38 VA-13 subline 2RA
- WI 38VA13 subline 2RA
- WI-38 VA13 sub 2 RA
- WI38-VA13 subline 2RA
- WI38 VA13/2RA
- WI38VA13/2RA
- VA13 2RA
- WI-38 VA13
- WI 38 VA 13
- WI38-VA13
- WI38/VA13
- WI38VA13
- VA-13
- VA13
- AG07217
- AG7217
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Moteris
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- Biologinio saugumo lygis
- 2
03Charakteristikos
- Morfologija
- Į epitelį panašus
- Ląstelių tipas
- Fibroblastai
- Kariotipas
- Hiperdiploidinis, Modalinis skaičius: 73-78
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- WI 38 VA13 sublinija 2RA (Cytion katalogo numeris 300421)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2759
05Išraiška ir jautrumas
- Izofermentai
- G6PD, B
- Virusai
- Sudėtyje yra papovaviruso
- Jautrumas virusams
- Paprastoji pūslelinė, vezikulinis stomatitas (Indiana), poliovirusas 2
- Atvirkštinė transkriptazė
- Neigiamas
06Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Sėjos tankis
- 1 x 104 ląstelės/cm2
- Skysčių atnaujinimas
- 1-2 kartus per savaitę
- Atkūrimas po atšilimo
- Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 48 valandas.
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
08Donoras
- Donoro amžius
- 3 nėštumo mėnesiai
- Etninė priklausomybė
- Kaukaziečių
09Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip
