Gå til innholdet
WI 38 VA13 subline 2RA
Vev
Lunge
Synonymer
WI 38 VA-13 subline 2RA, WI 38VA13 subline 2RA, WI-38 VA13 sub 2 RA, WI38-VA13 subline 2RA, WI38 VA13/2RA, WI38VA13/2RA, VA13 2RA, WI-38 VA13, WI 38 VA 13, WI38-VA13, WI38/VA13, WI38VA13, VA-13, VA13, AG07217, AG7217

Dokumenter

WI 38 VA13 subline 2RA

Cell line · Produktnummer 300421

The WI-38 VA13 subline 2RA, derived from the historic WI-38 cell line originally sourced from the lung tissue of a 3-month-old fetus, represents a key adv...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

WI-38 VA13 sublinje 2RA, som er avledet fra den historiske WI-38-cellelinjen som opprinnelig stammet fra lungevev fra et tre måneder gammelt foster, representerer et viktig fremskritt innen cellekulturteknologi. Den opprinnelige WI-38-cellelinjen var avgjørende for utviklingen av vaksiner mot en rekke virussykdommer, som meslinger, kusma, røde hunder og hepatitt A. VA13-sublinje 2RA er en udødeliggjort variant av denne cellelinjen, oppnådd gjennom transformasjon med Simian Virus 40 (SV40), en praksis som er vanlig i utviklingen av udødelige cellelinjer, og som muliggjør cellereplikasjon på ubestemt tid utover det vanlige senescenspunktet på rundt 50 populasjonsfordoblinger.

Ved å inkorporere SV40 i WI-38-cellene for å skape VA13-underlinjen 2RA forlenges cellenes levetid, noe som gir en mer holdbar modell for langtidseksperimenter. Denne transformasjonen opprettholder de grunnleggende egenskapene til de opprinnelige diploide cellene, men endrer livssyklusen og vekstmønstrene deres, noe som muliggjør vedvarende vekst og omfattende studier som ikke var mulig med den begrensede levetiden til den opprinnelige cellelinjen. Dette gjør VA13-sublinjen spesielt nyttig i pågående og omfattende forskningsområder, inkludert virologi, farmakologi og genetisk forskning, der det er nødvendig med lengre observasjonsperioder.

Vev
Lunge
Synonymer
  • WI 38 VA-13 subline 2RA
  • WI 38VA13 subline 2RA
  • WI-38 VA13 sub 2 RA
  • WI38-VA13 subline 2RA
  • WI38 VA13/2RA
  • WI38VA13/2RA
  • VA13 2RA
  • WI-38 VA13
  • WI 38 VA 13
  • WI38-VA13
  • WI38/VA13
  • WI38VA13
  • VA-13
  • VA13
  • AG07217
  • AG7217

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Fibroblast
Karyotype
Hyperdiploid, Modaltall: 73-78

04Identifikatorer

Kildehenvisning
WI 38 VA13 sublinje 2RA (Cytion katalognummer 300421)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2759

05Uttrykk og mottakelighet

Isoenzymer
G6PD, B
Virus
Inneholder papovavirus
Virusfølsomhet
Herpes simplex, vesikulær stomatitt (Indiana), poliovirus 2
Revers transkriptase
Negativ

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
1 til 2 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 48 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
3 måneders svangerskap
Etnisitet
Kaukasisk