Preskoči na vsebino
WI 38 VA13 subline 2RA
Tkivo
Pljuča
Sinonimi
WI 38 VA-13 subline 2RA, WI 38VA13 subline 2RA, WI-38 VA13 sub 2 RA, WI38-VA13 subline 2RA, WI38 VA13/2RA, WI38VA13/2RA, VA13 2RA, WI-38 VA13, WI 38 VA 13, WI38-VA13, WI38/VA13, WI38VA13, VA-13, VA13, AG07217, AG7217

Dokumenti

WI 38 VA13 subline 2RA

Cell line · Številka izdelka 300421

The WI-38 VA13 subline 2RA, derived from the historic WI-38 cell line originally sourced from the lung tissue of a 3-month-old fetus, represents a key adv...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Podlinija WI-38 VA13 2RA, ki izhaja iz zgodovinske celične linije WI-38, prvotno pridobljene iz pljučnega tkiva trimesečnega ploda, predstavlja ključni napredek v tehnologiji celičnih kultur. Prvotna celična linija WI-38 je bila ključna pri razvoju cepiv za številne virusne bolezni, kot so ošpice, mumps, rdečke in hepatitis A. Podlinija VA13 2RA je imortalizirana različica te celične linije, pridobljena s transformacijo z virusom Simian Virus 40 (SV40), kar je običajna praksa pri razvoju nesmrtnih celičnih linij, ki omogoča neomejeno replikacijo celic po standardni točki senescence pri približno 50 podvojitvah populacije.

Vključitev SV40 v celice WI-38, da bi ustvarili podlinijo VA13 2RA, podaljša življenjsko dobo celic, kar zagotavlja trajnejši model za dolgoročne poskuse. Ta transformacija ohranja temeljne lastnosti prvotnih diploidnih celic, vendar spreminja njihov življenjski cikel in vzorce rasti, kar omogoča trajno rast in olajša obsežne študije, ki jih z omejeno življenjsko dobo matične celične linije ni bilo mogoče izvesti. Zaradi tega je podlinija VA13 še posebej uporabna na stalnih in obsežnih raziskovalnih področjih, vključno z virologijo, farmakologijo in genetskimi raziskavami, kjer so potrebna daljša obdobja opazovanja.

Tkivo
Pljuča
Sinonimi
  • WI 38 VA-13 subline 2RA
  • WI 38VA13 subline 2RA
  • WI-38 VA13 sub 2 RA
  • WI38-VA13 subline 2RA
  • WI38 VA13/2RA
  • WI38VA13/2RA
  • VA13 2RA
  • WI-38 VA13
  • WI 38 VA 13
  • WI38-VA13
  • WI38/VA13
  • WI38VA13
  • VA-13
  • VA13
  • AG07217
  • AG7217

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
2

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Vrsta celice
Fibroblast
Kariotip
Hiperdiploidna, modalno število: 73-78

04Identifikatorji

Navajanje vira
WI 38 VA13 podlinija 2RA (kataloška številka Cytion 300421)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2759

05Izražanje in dovzetnost

Izoenzimi
G6PD, B
Virusi
Vsebuje papovavirus
Občutljivost na virus
Herpes simpleks, vezikularni stomatitis (Indiana), poliovirus 2
Reversna transkriptaza
Negativni

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
1 do 2-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrznitvi celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo za najmanj 48 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
3 mesece nosečnosti
Etnična pripadnost
Kavkaški