Tartalomra ugrás
266-6
Szövet
Hasnyálmirigy
Betegség
Egér hasnyálmirigy-acinusos daganat

Dokumentumok

266-6

Cell line · Termékszám 305363

The 266-6 cell line is a mouse pancreatic acinar cell model that has been extensively used in studies investigating pancreatic physiology and pathophysiol...

€550.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A 266-6 sejtvonal egy egér hasnyálmirigy-acinaris sejtmodell, amelyet széles körben alkalmaznak a hasnyálmirigy fiziológiáját és patofiziológiáját vizsgáló kutatásokban, különösen a hasnyálmirigy-gyulladás és a tápanyag-anyagcsere területén. Ez a sejtvonal egér hasnyálmirigy-acinaris sejtekből származik, amelyek az emésztőenzimek termelésére és szekréciójára specializálódtak.

A 266-6 sejtekkel végzett kutatások igazolták azok hasznosságát a sejthalál mechanizmusainak feltárásában, beleértve a ferroptózist is, amely egyfajta, lipidperoxidáció által vezérelt szabályozott nekrózis. Különösen azok a vizsgálatok mutatták ki, hogy a 266-6 sejtek, ha olyan anyagoknak vannak kitéve, mint a tripszin, a cerulein vagy az alkohol, érzékennyé válnak a ferroptózisra. Ez arra utal, hogy a 266-6 sejtek értékes modellt jelentenek a hasnyálmirigy-károsodásban szerepet játszó molekuláris útvonalak tanulmányozásához, különösen olyan állapotok esetében, mint az akut vagy krónikus hasnyálmirigy-gyulladás.

Ezen felül a 266-6 sejteket használták tápanyag-transzportmechanizmusok, például a tiamin (B1-vitamin) és annak foszforilált formája, a tiamin-pirofoszfát (TPP) felvételének vizsgálatára is. Kimutatták, hogy az alkoholhoz vagy a proinflammatorikus citokinekhez hasonló tényezőknek való krónikus kitettség károsítja a tiamin felvételét ezekben a sejtekben. Ez a károsodás mind a tiamin-transzporterek (THTR-1 és THTR-2), mind a mitokondriális TPP-transzporter (MTPPT) transzkripciós és fehérjeexpressziós szintjén jelentkezik, ami hatással van a hasnyálmirigy-sejtek anyagcseréjére és hozzájárul a mitokondriális diszfunkcióhoz.

Szövet
Hasnyálmirigy
Betegség
Egér hasnyálmirigy-acinusos daganat

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nem meghatározott
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This mouse pancreatic acinar cell line contains an SV40 large T antigen expression cassette under control of the elastase-1 promoter, driving immortalization of exocrine pancreatic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Hasnyálmirigy-acinaris sejt

04Azonosítók

Hivatkozás
266-6 (Cytion katalógusszám: 305363)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_3481

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
Muszkarinerg acetilkolin-receptor

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1–3 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Felnőtt