Siirry sisältöön
266-6
Kudos
Haima
Sairaus
Hiiren haiman rauhasrakkuloiden kasvain

Asiakirjat

266-6

Cell line · Tuotenumero 305363

The 266-6 cell line is a mouse pancreatic acinar cell model that has been extensively used in studies investigating pancreatic physiology and pathophysiol...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

266-6-solulinja on hiiren haiman asinaarisolujen malli, jota on käytetty laajasti haiman fysiologiaa ja patofysiologiaa koskevissa tutkimuksissa, erityisesti haimatulehduksen ja ravintoaineiden aineenvaihdunnan yhteydessä. Tämä solulinja on peräisin hiiren haiman asinaarisoluista, jotka ovat erikoistuneet ruoansulatusentsyymien tuotantoon ja erittymiseen.

266-6-soluja koskevat tutkimukset ovat osoittaneet niiden hyödyllisyyden solukuoleman mekanismien tutkimuksessa, mukaan lukien ferroptosis, joka on eräs lipidiperoksidaation aiheuttama säännelty nekroosimuoto. Erityisesti tutkimukset ovat osoittaneet, että 266-6-solut herkistyvät ferroptosille, kun ne altistetaan aineille kuten trypsiinille, seruleiinille tai alkoholille. Tämä viittaa siihen, että 266-6-solut ovat arvokas malli haiman vaurioihin liittyvien molekyylireittien tutkimiseen, erityisesti akuutin tai kroonisen haimatulehduksen kaltaisissa tiloissa.

Lisäksi 266-6-soluja on käytetty ravinteiden kuljetusmekanismien, kuten tiamiinin (B1-vitamiini) ja sen fosforyloidun muodon, tiamiinipyrofosfaatin (TPP), imeytymisen tutkimiseen. On osoitettu, että pitkäaikainen altistuminen tekijöille, kuten alkoholille tai proinflammatorisille sytokiinille, heikentää tiamiinin imeytymistä näihin soluihin. Tämä heikentyminen ilmenee sekä tiamiinikuljettajien THTR-1 ja THTR-2 että mitokondriaalisen TPP-kuljettajan (MTPPT) transkriptio- että proteiini-ilmentymistasoilla, mikä vaikuttaa haimasolujen aineenvaihduntaan ja edistää mitokondrioiden toimintahäiriötä.

Kudos
Haima
Sairaus
Hiiren haiman rauhasrakkuloiden kasvain

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This mouse pancreatic acinar cell line contains an SV40 large T antigen expression cassette under control of the elastase-1 promoter, driving immortalization of exocrine pancreatic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Haiman asinaarisolu

04Tunnisteet

Lähdeviite
266-6 (Cytion-tuotenumero 305363)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_3481

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Muskarininen asetyylikoliinireseptori

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–3 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Aikuiset