Pāriet uz saturu
266-6
Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Peles aizkuņģa dziedzera acināro šūnu audzējs

Dokumenti

266-6

Cell line · Preces numurs 305363

The 266-6 cell line is a mouse pancreatic acinar cell model that has been extensively used in studies investigating pancreatic physiology and pathophysiol...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Šūnu līnija 266-6 ir peles aizkuņģa dziedzera acināro šūnu modelis, ko plaši izmanto pētījumos, kuros izpēta aizkuņģa dziedzera fizioloģiju un patofizioloģiju, jo īpaši saistībā ar pankreatītu un uzturvielu vielmaiņu. Šī šūnu līnija ir iegūta no peles aizkuņģa dziedzera acinārajām šūnām, kas specializējušās gremošanas enzīmu ražošanā un sekrēcijā.

Pētījumi par 266-6 šūnām ir pierādījuši to lietderību šūnu nāves mehānismu izpētē, tostarp ferroptozes gadījumā — regulētas nekrozes veida, ko izraisa lipīdu peroksidācija. Jo īpaši pētījumi ir parādījuši, ka 266-6 šūnas, tām nonākot saskarsmē ar tādiem aģentiem kā tripsīns, ceruleīns vai spirts, kļūst jutīgākas pret ferroptōzi. Tas liecina, ka 266-6 šūnas ir vērtīgs modelis, lai pētītu molekulāros ceļus, kas saistīti ar aizkuņģa dziedzera bojājumiem, īpaši tādos stāvokļos kā akūts vai hronisks pankreatīts.

Turklāt 266-6 šūnas ir izmantotas, lai pētītu uzturvielu transporta mehānismus, piemēram, tiamīna (B1 vitamīna) un tā fosforilētās formas — tiamīna pirofosfāta (TPP) — uzsūkšanos. Ir pierādīts, ka hroniska pakļaušana tādiem faktoriem kā alkohols vai proinflamatoriskie citokīni traucē šo šūnu tiamīna uzsūkšanos. Šis traucējums notiek gan tiamīna transportētāju THTR-1 un THTR-2 transkripcijas, gan proteīnu ekspresijas līmenī, kā arī mitohondriālā TPP transportētāja (MTPPT) līmenī, ietekmējot aizkuņģa dziedzera šūnu vielmaiņu un veicinot mitohondriālo disfunkciju.

Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Peles aizkuņģa dziedzera acināro šūnu audzējs

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This mouse pancreatic acinar cell line contains an SV40 large T antigen expression cassette under control of the elastase-1 promoter, driving immortalization of exocrine pancreatic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Aizkuņģa dziedzera acināro šūna

04Identifikatori

Atsauce
266-6 (Cytion kataloga numurs 305363)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_3481

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Muskarīniskais acetilholīna receptors

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Pieaugušo