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266-6
Pañuelo de papel
Páncreas
Enfermedad
Neoplasia acinar pancreática en ratones

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266-6

Cell line · Número de producto 305363

The 266-6 cell line is a mouse pancreatic acinar cell model that has been extensively used in studies investigating pancreatic physiology and pathophysiol...

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01Información general

Descripción

La línea celular 266-6 es un modelo de células acinares pancreáticas de ratón que se ha utilizado ampliamente en estudios sobre la fisiología y la fisiopatología del páncreas, especialmente en lo relacionado con la pancreatitis y el metabolismo de los nutrientes. Esta línea celular se deriva de células acinares pancreáticas de ratón, especializadas en la producción y secreción de enzimas digestivas.

Las investigaciones con células 266-6 han demostrado su utilidad para estudiar los mecanismos de muerte celular, incluida la ferroptosis, un tipo de necrosis regulada provocada por la peroxidación lipídica. En concreto, los estudios han demostrado que las células 266-6, cuando se exponen a agentes como la tripsina, la ceruleína o el alcohol, se vuelven sensibles a la ferroptosis. Esto sugiere que las células 266-6 constituyen un valioso modelo para estudiar las vías moleculares implicadas en la lesión pancreática, especialmente en afecciones como la pancreatitis aguda o crónica.

Además, las células 266-6 se han utilizado para estudiar mecanismos de transporte de nutrientes, como la captación de tiamina (vitamina B1) y su forma fosforilada, el pirofosfato de tiamina (TPP). Se ha demostrado que la exposición crónica a factores como el alcohol o las citocinas proinflamatorias altera la captación de tiamina por parte de estas células. Esta alteración se produce tanto a nivel transcripcional como de expresión proteica de los transportadores de tiamina THTR-1 y THTR-2, así como del transportador mitocondrial de TPP (MTPPT), lo que afecta al metabolismo de las células pancreáticas y contribuye a la disfunción mitocondrial.

Pañuelo de papel
Páncreas
Enfermedad
Neoplasia acinar pancreática en ratones

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Sin especificar
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This mouse pancreatic acinar cell line contains an SV40 large T antigen expression cassette under control of the elastase-1 promoter, driving immortalization of exocrine pancreatic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
2

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tipo de célula
Célula acinar pancreática

04Identificadores

Referencia
266-6 (número de catálogo de Cytion: 305363)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_3481

05Expresión y susceptibilidad

Receptores expresados
Receptor muscarínico de acetilcolina

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
De 1 a 3 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Adultos