Ga naar de inhoud
266-6
Weefsel
Alvleesklier
Ziekte
Neoplasma van de acinaire cellen van de alvleesklier bij de muis

Documenten

266-6

Cell line · Productnummer 305363

The 266-6 cell line is a mouse pancreatic acinar cell model that has been extensively used in studies investigating pancreatic physiology and pathophysiol...

€550.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De 266-6-cellijn is een model van acinaire cellen uit de alvleesklier van de muis dat op grote schaal is gebruikt in onderzoeken naar de fysiologie en pathofysiologie van de alvleesklier, met name in verband met pancreatitis en het metabolisme van voedingsstoffen. Deze cellijn is afgeleid van acinaire cellen uit de alvleesklier van de muis, die gespecialiseerd zijn in de productie en afscheiding van spijsverteringsenzymen.

Onderzoek naar 266-6-cellen heeft aangetoond dat ze bruikbaar zijn bij het onderzoeken van mechanismen van celdood, waaronder ferroptose, een vorm van gereguleerde necrose die wordt aangedreven door lipideperoxidatie. Met name hebben studies aangetoond dat 266-6-cellen, wanneer ze worden blootgesteld aan stoffen zoals trypsine, ceruleïne of alcohol, gevoeliger worden voor ferroptose. Dit suggereert dat 266-6-cellen een waardevol model vormen voor het bestuderen van de moleculaire routes die betrokken zijn bij pancreasbeschadiging, met name bij aandoeningen zoals acute of chronische pancreatitis.

Daarnaast zijn 266-6-cellen gebruikt voor het bestuderen van mechanismen voor het transport van voedingsstoffen, zoals de opname van thiamine (vitamine B1) en de gefosforyleerde vorm daarvan, thiaminepyrofosfaat (TPP). Er is aangetoond dat chronische blootstelling aan factoren zoals alcohol of pro-inflammatoire cytokines de opname van thiamine door deze cellen belemmert. Deze verstoring treedt op zowel op transcriptieniveau als op het niveau van de eiwitexpressie van de thiaminetransporters THTR-1 en THTR-2, evenals van de mitochondriale TPP-transporter (MTPPT), wat het metabolisme van de pancreascellen beïnvloedt en bijdraagt aan mitochondriale disfunctie.

Weefsel
Alvleesklier
Ziekte
Neoplasma van de acinaire cellen van de alvleesklier bij de muis

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Niet gespecificeerd
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This mouse pancreatic acinar cell line contains an SV40 large T antigen expression cassette under control of the elastase-1 promoter, driving immortalization of exocrine pancreatic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Acinaire cel van de alvleesklier

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
266-6 (Cytion-catalogusnummer 305363)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_3481

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Muscarinische acetylcholinereceptor

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 tot 3 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
Volwassen