Mine otse sisu juurde
266-6
Kude
Pankreas
Haigus
Hiire pankrease acinaarne kasvaja

Dokumendid

266-6

Cell line · Toote number 305363

The 266-6 cell line is a mouse pancreatic acinar cell model that has been extensively used in studies investigating pancreatic physiology and pathophysiol...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Rakuliin 266-6 on hiire pankrease atsinaarrakkude mudel, mida on laialdaselt kasutatud pankrease füsioloogiat ja patofüsioloogiat uurivates uuringutes, eelkõige seoses pankreatiidi ja toitainete ainevahetusega. See rakuliin on saadud hiire pankrease atsinaarrakkudest, mis on spetsialiseerunud seedimisensüümide tootmisele ja eritusele.

266-6 rakkude uuringud on näidanud nende kasulikkust rakkude surma mehhanismide uurimisel, sealhulgas ferroptose puhul, mis on lipiidide peroksüdatsiooni poolt põhjustatud reguleeritud nekroosi tüüp. Eelkõige on uuringud näidanud, et 266-6 rakud muutuvad ferroptose suhtes tundlikuks, kui neid mõjutatakse selliste ainetega nagu trüpsiin, tseruleiin või alkohol. See viitab sellele, et 266-6 rakud on väärtuslik mudel kõhunäärme kahjustusega seotud molekulaarsete signaaliteede uurimiseks, eriti selliste seisundite puhul nagu äge või krooniline pankreatiit.

Lisaks on 266-6 rakke kasutatud toitainete transportmehhanismide uurimiseks, näiteks tiamiini (vitamiin B1) ja selle fosforüülitud vormi, tiamiinpürofosfaadi (TPP) omastamiseks. On näidatud, et krooniline kokkupuude selliste teguritega nagu alkohol või proinflammatoorsed tsütokiinid kahjustab tiamiini omastamist nendes rakkudes. See häire esineb nii tiamiini transportijate THTR-1 ja THTR-2 transkriptsiooni- kui ka valgu ekspressiooni tasandil, samuti mitokondriaalse TPP-transpordija (MTPPT) tasandil, mõjutades pankrease rakkude ainevahetust ja soodustades mitokondriaalset düsfunktsiooni.

Kude
Pankreas
Haigus
Hiire pankrease acinaarne kasvaja

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This mouse pancreatic acinar cell line contains an SV40 large T antigen expression cassette under control of the elastase-1 promoter, driving immortalization of exocrine pancreatic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Pankrease atsinaarrakk

04Tunnused

Viide
266-6 (Cytioni katalooginumber 305363)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_3481

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Muskariniline atsetüülkoliini retseptor

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Täiskasvanud