Przejdź do treści
266-6
Chusteczka
Trzustka
Choroba
Nowotwór zrazikowy trzustki u myszy

Dokumenty

266-6

Cell line · Numer produktu 305363

The 266-6 cell line is a mouse pancreatic acinar cell model that has been extensively used in studies investigating pancreatic physiology and pathophysiol...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa 266-6 stanowi mysi model komórek zrazikowych trzustki, który jest szeroko wykorzystywany w badaniach dotyczących fizjologii i patofizjologii trzustki, zwłaszcza w kontekście zapalenia trzustki i metabolizmu składników odżywczych. Linia ta pochodzi z mysich komórek zrazikowych trzustki, które są wyspecjalizowane w produkcji i wydzielaniu enzymów trawiennych.

Badania nad komórkami 266-6 wykazały ich przydatność w badaniu mechanizmów śmierci komórkowej, w tym ferroptozy, czyli rodzaju regulowanej nekrozy wywołanej peroksydacją lipidów. W szczególności badania wykazały, że komórki 266-6, po ekspozycji na czynniki takie jak trypsyna, ceruleina lub alkohol, stają się wrażliwe na ferroptozę. Sugeruje to, że komórki 266-6 stanowią cenny model do badania szlaków molekularnych związanych z uszkodzeniem trzustki, zwłaszcza w stanach takich jak ostre lub przewlekłe zapalenie trzustki.

Ponadto komórki 266-6 wykorzystywano do badania mechanizmów transportu składników odżywczych, takich jak wychwyt tiaminy (witaminy B1) i jej fosforylowanej formy, pirofosforanu tiaminy (TPP). Wykazano, że przewlekła ekspozycja na czynniki takie jak alkohol lub cytokiny prozapalne upośledza wychwyt tiaminy przez te komórki. Upośledzenie to występuje zarówno na poziomie transkrypcji, jak i ekspresji białek transporterów tiaminy THTR-1 i THTR-2, a także mitochondrialnego transportera TPP (MTPPT), co wpływa na metabolizm komórek trzustki i przyczynia się do dysfunkcji mitochondriów.

Chusteczka
Trzustka
Choroba
Nowotwór zrazikowy trzustki u myszy

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Nieokreślone
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This mouse pancreatic acinar cell line contains an SV40 large T antigen expression cassette under control of the elastase-1 promoter, driving immortalization of exocrine pancreatic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Typ komórki
Komórka zrazikowa trzustki

04Identyfikatory

Źródło
266-6 (numer katalogowy Cytion: 305363)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_3481

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Receptor acetylocholiny typu muskarynowego

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 do 3 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
Dorosły