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266-6
Tecido
Pâncreas
Doença
Neoplasia acinar do pâncreas do rato

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266-6

Cell line · Número do produto 305363

The 266-6 cell line is a mouse pancreatic acinar cell model that has been extensively used in studies investigating pancreatic physiology and pathophysiol...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular 266-6 é um modelo de células acinares pancreáticas de ratinho que tem sido amplamente utilizado em estudos que investigam a fisiologia e a fisiopatologia do pâncreas, particularmente no que se refere à pancreatite e ao metabolismo dos nutrientes. Esta linha celular é derivada de células acinares pancreáticas de ratinho, que são especializadas na produção e secreção de enzimas digestivas.

A investigação sobre as células 266-6 demonstrou a sua utilidade na exploração de mecanismos de morte celular, incluindo a ferroptose, um tipo de necrose regulada induzida pela peroxidação lipídica. Em particular, estudos demonstraram que as células 266-6, quando expostas a agentes como a tripsina, a ceruleína ou o álcool, tornam-se sensíveis à ferroptose. Isto sugere que as células 266-6 constituem um modelo valioso para o estudo das vias moleculares envolvidas na lesão pancreática, especialmente em condições como a pancreatite aguda ou crónica.

Além disso, as células 266-6 têm sido utilizadas para estudar mecanismos de transporte de nutrientes, tais como a captação de tiamina (vitamina B1) e a sua forma fosforilada, o pirofosfato de tiamina (TPP). Demonstrou-se que a exposição crónica a fatores como o álcool ou citocinas pró-inflamatórias prejudica a captação de tiamina por estas células. Este comprometimento ocorre tanto ao nível da transcrição como da expressão proteica dos transportadores de tiamina THTR-1 e THTR-2, bem como do transportador mitocondrial de TPP (MTPPT), afetando o metabolismo das células pancreáticas e contribuindo para a disfunção mitocondrial.

Tecido
Pâncreas
Doença
Neoplasia acinar do pâncreas do rato

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Não especificado
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This mouse pancreatic acinar cell line contains an SV40 large T antigen expression cassette under control of the elastase-1 promoter, driving immortalization of exocrine pancreatic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
2

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Célula acinar do pâncreas

04Identificadores

Referência
266-6 (número de catálogo da Cytion 305363)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_3481

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Receptor muscarínico da acetilcolina

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 a 3 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
Adulto