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266-6
Tessuto
Pancreas
Malattia
Neoplasia acinaria del pancreas del topo

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266-6

Cell line · Codice prodotto 305363

The 266-6 cell line is a mouse pancreatic acinar cell model that has been extensively used in studies investigating pancreatic physiology and pathophysiol...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare 266-6 è un modello di cellule acinose pancreatiche di topo ampiamente utilizzato negli studi sulla fisiologia e la fisiopatologia del pancreas, in particolare in relazione alla pancreatite e al metabolismo dei nutrienti. Questa linea cellulare deriva dalle cellule acinose pancreatiche di topo, specializzate nella produzione e nella secrezione di enzimi digestivi.

La ricerca sulle cellule 266-6 ha dimostrato la loro utilità nell’esplorazione dei meccanismi di morte cellulare, tra cui la ferroptosi, un tipo di necrosi regolata indotta dalla perossidazione lipidica. In particolare, alcuni studi hanno dimostrato che le cellule 266-6, se esposte ad agenti quali la tripsina, la ceruleina o l’alcol, diventano sensibili alla ferroptosi. Ciò suggerisce che le cellule 266-6 rappresentino un modello prezioso per lo studio delle vie molecolari coinvolte nel danno pancreatico, specialmente in condizioni quali la pancreatite acuta o cronica.

Inoltre, le cellule 266-6 sono state utilizzate per studiare i meccanismi di trasporto dei nutrienti, come l’assorbimento della tiamina (vitamina B1) e della sua forma fosforilata, il pirofosfato di tiamina (TPP). È stato dimostrato che l’esposizione cronica a fattori quali l’alcol o le citochine proinfiammatorie compromette l’assorbimento della tiamina da parte di queste cellule. Tale compromissione si verifica sia a livello trascrizionale che a livello di espressione proteica dei trasportatori della tiamina THTR-1 e THTR-2, nonché del trasportatore mitocondriale del TPP (MTPPT), influenzando il metabolismo delle cellule pancreatiche e contribuendo alla disfunzione mitocondriale.

Tessuto
Pancreas
Malattia
Neoplasia acinaria del pancreas del topo

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Non specificato
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This mouse pancreatic acinar cell line contains an SV40 large T antigen expression cassette under control of the elastase-1 promoter, driving immortalization of exocrine pancreatic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Cellula acinaria del pancreas

04Identificatori

Riferimento bibliografico
266-6 (codice catalogo Cytion 305363)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_3481

05Espressione e suscettibilità

Recettori espressi
Recettore muscarinico dell'acetilcolina

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
Da 1 a 3 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
Adulti