İçeriğe atla
266-6
Doku
Pankreas
Hastalık
Fare pankreas asiner neoplazmı

266-6

Cell line · Ürün numarası 305363

The 266-6 cell line is a mouse pancreatic acinar cell model that has been extensively used in studies investigating pancreatic physiology and pathophysiol...

€550.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

266-6 hücre hattı, özellikle pankreatit ve besin metabolizmasıyla ilgili pankreas fizyolojisi ve patofizyolojisini inceleyen çalışmalarda yaygın olarak kullanılan bir fare pankreas asiner hücre modelidir. Bu hücre hattı, sindirim enzimlerinin üretimi ve salgılanması için özelleşmiş fare pankreas asiner hücrelerinden türetilmiştir.

266-6 hücreleri üzerine yapılan araştırmalar, bu hücrelerin, lipit peroksidasyonu tarafından tetiklenen bir tür düzenlenmiş nekroz olan ferroptoz dahil olmak üzere hücre ölümü mekanizmalarının araştırılmasında yararlı olduğunu göstermiştir. Özellikle yapılan çalışmalar, 266-6 hücrelerinin tripsin, serulein veya alkol gibi maddelere maruz kaldıklarında ferroptosa karşı duyarlı hale geldiğini göstermiştir. Bu durum, 266-6 hücrelerinin, özellikle akut veya kronik pankreatit gibi durumlarda pankreas hasarında rol oynayan moleküler yolakları incelemek için değerli bir model olduğunu göstermektedir.

Ek olarak, 266-6 hücreleri, tiamin (B1 vitamini) ve bunun fosforile formu olan tiamin pirofosfatın (TPP) alımı gibi besin taşıma mekanizmalarını incelemek için kullanılmıştır. Alkol veya proinflamatuar sitokinler gibi faktörlere kronik maruz kalmanın, bu hücreler tarafından tiamin alımını bozduğu gösterilmiştir. Bu bozulma, tiamin taşıyıcıları THTR-1 ve THTR-2’nin yanı sıra mitokondriyal TPP taşıyıcısının (MTPPT) hem transkripsiyon hem de protein ekspresyon düzeylerinde meydana gelir; bu durum pankreas hücrelerinin metabolizmasını etkiler ve mitokondriyal disfonksiyona katkıda bulunur.

Doku
Pankreas
Hastalık
Fare pankreas asiner neoplazmı

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Belirtilmemiş
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This mouse pancreatic acinar cell line contains an SV40 large T antigen expression cassette under control of the elastase-1 promoter, driving immortalization of exocrine pancreatic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
2

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Hücre türü
Pankreas asiner hücresi

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
266-6 (Cytion katalog numarası 305363)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_3481

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
Muskarinik asetilkolin reseptörü

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 ila 3 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
Yetişkin