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266-6
Tissue
Pâncreas
Disease
Neoplasia acinar do pâncreas em camundongos

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266-6

Cell line · Product number 305363

The 266-6 cell line is a mouse pancreatic acinar cell model that has been extensively used in studies investigating pancreatic physiology and pathophysiol...

US$540.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

A linhagem celular 266-6 é um modelo de células acinares pancreáticas de camundongo amplamente utilizado em estudos que investigam a fisiologia e a fisiopatologia do pâncreas, particularmente no que se refere à pancreatite e ao metabolismo de nutrientes. Essa linhagem celular é derivada de células acinares pancreáticas de camundongo, que são especializadas na produção e secreção de enzimas digestivas.

Pesquisas com as células 266-6 demonstraram sua utilidade na exploração de mecanismos de morte celular, incluindo a ferroptose, um tipo de necrose regulada induzida pela peroxidação lipídica. Em particular, estudos demonstraram que as células 266-6, quando expostas a agentes como tripsina, ceruleína ou álcool, tornam-se sensíveis à ferroptose. Isso sugere que as células 266-6 são um modelo valioso para o estudo das vias moleculares envolvidas na lesão pancreática, especialmente em condições como a pancreatite aguda ou crônica.

Além disso, as células 266-6 têm sido utilizadas para estudar mecanismos de transporte de nutrientes, como a captação de tiamina (vitamina B1) e sua forma fosforilada, o pirofosfato de tiamina (TPP). Demonstrou-se que a exposição crônica a fatores como álcool ou citocinas pró-inflamatórias prejudica a captação de tiamina por essas células. Esse comprometimento ocorre tanto no nível transcricional quanto no de expressão proteica dos transportadores de tiamina THTR-1 e THTR-2, bem como do transportador mitocondrial de TPP (MTPPT), afetando o metabolismo das células pancreáticas e contribuindo para a disfunção mitocondrial.

Tissue
Pâncreas
Disease
Neoplasia acinar do pâncreas em camundongos

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This mouse pancreatic acinar cell line contains an SV40 large T antigen expression cassette under control of the elastase-1 promoter, driving immortalization of exocrine pancreatic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Cell type
Célula acinar do pâncreas

04Identifiers

Citation
266-6 (número de catálogo da Cytion 305363)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_3481

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Receptor muscarínico de acetilcolina

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Seeding density
1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
Adulto