B-LCL-HROC60

A B-LCL-HROC60 egy Epstein-Barr vírus (EBV) által immortálisított humán B-limfoblasztos sejtvonal, amelyet HROC60 nevű primer kolorektális karcinómából izolált tumorbehatoló B-sejtekből (TiBc) hoztak létre. Az anyasejt tumor egy felnőtt férfi betegtől származik, aki jobb oldali kolorektális karcinómában szenvedett, CpG-sziget metilátor fenotípus-magas (CIMP-H) molekuláris altípussal. A friss tumor szövetet mechanikusan diszociálták, hogy egysejtű szuszpenziót kapjanak, és a B sejteket szelektíven immortalizálták in vitro EBV-t tartalmazó felülúszóval, amelyet a B95/8 marmoset sejtvonalból nyertek ki ciklosporin A jelenlétében, hogy elnyomják a T- és NK-sejtek növekedését. A hosszú távú expanzió monoklonális B-sejt kultúrát eredményezett, amit standardizált klonalitási vizsgálatokkal végzett immunglobulin nehéz- és könnyű lánc génátrendeződés elemzéssel is megerősítettek.

A B-LCL-HROC60 immunoglobulin M-et (IgM) szekretál domináns izotípusként, amelynek termelése a hosszabb tenyésztés során stabil marad. A kolorektális karcinómából generált, tumorba infiltráló B-sejtvonalak szélesebb sorozatában az immunoglobulin szekréciója klónonként egyetlen fő izotípusra korlátozódott, és exogén EBV hiányában nem történt spontán növekedés, kizárva a látens in vivo EBV-vezérelt transzformációt. A CIMP-H kolorektális karcinómából származó monoklonális, antigénnel tapasztalt TiBc-származékos vonal, a B-LCL-HROC60 releváns in vitro modellt biztosít a kolorektális tumor mikrokörnyezetben zajló humorális immunválaszok vizsgálatához és a tumorba beszivárgó B-sejtekből származó antitestek funkcionális tulajdonságainak jellemzéséhez.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban