B-LCL-HROC60

B-LCL-HROC60 yra Epstein-Barr viruso (EBV) nemirtinga žmogaus B limfoblastoidų ląstelių linija, sukurta iš naviko infiltruojančių B ląstelių (TiBc), izoliuotų iš pirminio kolorektalinio karcinomo, pavadinto HROC60. Pirminis navikas buvo paimtas iš suaugusio vyro, sergančio dešiniojo pusės kolorektaliniu karcinoma, turinčiu CpG salos metilatoriaus fenotipo-aukšto (CIMP-H) molekulinį potipį. Šviežias naviko audinys buvo mechaniniu būdu suskaidytas, kad būtų gautas vienaląstis suspensijas, o B ląstelės buvo selektyviai nemirtingos in vitro, naudojant EBV turintį supernatantą, gautą iš B95/8 marmoset ląstelių linijos, esant ciklosporinui A, siekiant slopinti T ir NK ląstelių augimą. Ilgalaikis augimas davė monokloninę B ląstelių kultūrą, kaip patvirtino imunoglobulino sunkiųjų ir lengvųjų grandžių genų pertvarkymo analizė, naudojant standartizuotus klonalumo tyrimus.

B-LCL-HROC60 išskiria imunoglobuliną M (IgM) kaip dominuojantį izotipą, kurio gamyba yra stabili per ilgą kultūrą. Platesnėje serijoje naviką infiltruojančių B ląstelių linijų, gautų iš kolorektalinio karcinomo, imunoglobulino sekrecija buvo apribota iki vieno pagrindinio izotipo vienam klonui, ir nesusidarė spontaniškas augimas be egzogeninio EBV, išskyrus latentinę in vivo EBV sukeltą transformaciją. Kaip monokloninė, antigeną patyrusi TiBc kilusi linija iš CIMP-H kolorektalinės karcinomos, B-LCL-HROC60 suteikia atitinkamą in vitro modelį humorinių imuninių atsakų kolorektalinės naviko mikroaplinkoje tyrimui ir naviką infiltruojančių B ląstelių kilusių antikūnų funkcinių savybių charakterizavimui.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime