B-LCL-HROC60

B-LCL-HROC60 是一種由愛潑斯坦-巴爾病毒（EBV）使之不朽化的人類 B 淋巴母細胞樣細胞系，源自一例編號為 HROC60 的原發性結直腸癌中分離出的腫瘤浸潤性 B 細胞（TiBc）。 該原始腫瘤源自一名成年男性患者，其患有屬於 CpG 島甲基化表型高（CIMP-H）分子亞型的右側結直腸癌。 將新鮮腫瘤組織經機械性分離以獲得單細胞懸浮液，並在環孢素 A 的存在下，利用源自 B95/8 狨猴細胞系的含 EBV 上清液，於體外選擇性地將 B 細胞永生化，以抑制 T 細胞和 NK 細胞的增生。 經長期擴增後，形成單克隆 B 細胞培養物，此結果經採用標準化克隆性檢測進行的免疫球蛋白重鏈與輕鏈基因重排分析所證實。

B-LCL-HROC60 分泌以免疫球蛋白 M（IgM）為主的同型，且在長期培養過程中能穩定產生。 在由結直腸癌衍生的更廣泛的腫瘤浸潤性 B 細胞系系列中，免疫球蛋白的分泌限於每個克隆的單一主要同型，且在缺乏外源性 EBV 的情況下未發生自發性增殖，這排除了由體內潛伏 EBV 驅動的轉化。 作為源自 CIMP-H 結直腸癌、具有抗原接觸經驗的單克隆 TiBc 衍生物系， B-LCL-HROC60 提供了一個相關的體外模型，可用於研究結直腸腫瘤微環境中的體液免疫反應，並闡明腫瘤浸潤 B 細胞衍生抗體的功能特性。

37°C，5% CO_₂，加濕環境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。

詳情請參閱我們的 《保固聲明》。