B-LCL-HROC60

B-LCL-HROC60 เป็นเซลล์ไลน์ลิมโฟบลาสต์ของมนุษย์ที่คงสภาพความเป็นอมตะด้วยไวรัสเอปสไตน์-บาร์ (EBV) ซึ่งสร้างขึ้นจากเซลล์บีลิมโฟบลาสต์ที่แทรกซึมในเนื้องอก (TiBc) ที่แยกได้จากมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักระยะเริ่มต้นซึ่งมีชื่อว่า HROC60 เนื้องอกของพ่อแม่มีต้นกำเนิดจากผู้ป่วยชายวัยผู้ใหญ่ที่มีมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักด้านขวาชนิดโมเลกุล CpG island methylator phenotype-high (CIMP-H) เนื้อเยื่อเนื้องอกสดถูกแยกออกทางกลเพื่อได้สารแขวนลอยเซลล์เดี่ยว และเซลล์บีถูกทำให้เป็นอมตะอย่างเลือกสรรในหลอดทดลองโดยใช้สารเหนือตะกอนที่มีเชื้อ EBV ซึ่งสกัดจากสายพันธุ์เซลล์ B95/8 ของลิงมาร์โมเซต ร่วมกับไซโคลสปอรินเอเพื่อยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์ทีและเซลล์เอ็นเค การขยายตัวในระยะยาวส่งผลให้เกิดการเพาะเลี้ยงเซลล์บีชนิดโมโนโคลนอล ซึ่งได้รับการยืนยันโดยการวิเคราะห์การจัดเรียงยีนของสายโซ่หนักและสายโซ่เบาของอิมมูโนโกลบูลิน โดยใช้การทดสอบความคลอนมาตรฐาน

B-LCL-HROC60 ผลิตอิมมูโนโกลบูลิน M (IgM) เป็นไอโซไทป์หลัก โดยมีปริมาณการผลิตที่คงที่ตลอดการเพาะเลี้ยงเป็นระยะเวลานาน ในกลุ่มเซลล์ B ที่แทรกซึมในเนื้องอกซึ่งสร้างขึ้นจากมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก การหลั่งอิมมูโนโกลบูลินถูกจำกัดให้อยู่ในไอโซไทป์หลักเพียงชนิดเดียวต่อโคลน และไม่มีการเจริญเติบโตโดยธรรมชาติเกิดขึ้นเมื่อไม่มีเชื้อ EBV จากภายนอก ยกเว้นการเปลี่ยนแปลงที่เกิดจาก EBV ที่แฝงตัวในร่างกาย ในฐานะที่เป็นสายพันธุ์ที่ได้จาก TiBc ซึ่งผ่านประสบการณ์แอนติเจนและเป็นโมโนโคลนอลจากมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก CIMP-H, B-LCL-HROC60 จึงเป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่มีความเกี่ยวข้องสำหรับการศึกษาการตอบสนองของภูมิคุ้มกันทางน้ำเหลืองภายในสภาพแวดล้อมจุลภาคของเนื้องอกในลำไส้ใหญ่และทวารหนัก และสำหรับการกำหนดลักษณะสมบัติการทำงานของแอนติบอดีที่มาจากเซลล์บีที่แทรกซึมในเนื้องอก

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.