B-LCL-HROC60

B-LCL-HROC60, HROC60 olarak adlandırılan primer kolorektal karsinomdan izole edilen tümör infiltre edici B hücrelerinden (TiBc) oluşturulan Epstein-Barr virüsü (EBV) ile ölümsüzleştirilmiş insan B lenfoblastoid hücre hattıdır. Ana tümör, CpG ada metilatör fenotipi yüksek (CIMP-H) moleküler alt tipinde sağ taraf kolorektal karsinomlu yetişkin bir erkek hastadan kaynaklanmıştır. Taze tümör dokusu, tek hücreli süspansiyonlar elde etmek için mekanik olarak ayrıştırılmış ve B hücreleri, T ve NK hücrelerinin büyümesini bastırmak için siklosporin A varlığında B95/8 marmoset hücre hattından elde edilen EBV içeren süpernatant kullanılarak in vitro olarak seçici bir şekilde ölümsüzleştirilmiştir. Uzun süreli genişleme, standart klonalite testleri kullanılarak immünoglobulin ağır ve hafif zincir gen yeniden düzenleme analizi ile doğrulanan monoklonal B hücresi kültürü ile sonuçlandı.

B-LCL-HROC60, uzun süreli kültürde stabil üretim ile dominant izotipi olarak immünoglobulin M (IgM) salgılar. Kolorektal karsinomdan üretilen daha geniş bir dizi tümör infiltre edici B hücre hattında, immünoglobulin salgısı klon başına tek bir ana izotip ile sınırlıydı ve ekzojen EBV yokluğunda spontan büyüme meydana gelmedi, bu da in vivo EBV kaynaklı latent transformasyonu hariç tuttu. CIMP-H kolorektal karsinomdan elde edilen, antijen deneyimli, monoklonal TiBc türevi bir hat olan B-LCL-HROC60, kolorektal tümör mikroçevresi içindeki humoral bağışıklık yanıtlarını araştırmak ve tümör infiltre edici B hücresi türevi antikorların fonksiyonel özelliklerini karakterize etmek için ilgili bir in vitro model sağlar.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın