B-LCL-HROC60

B-LCL-HROC60是一种由原发性结直肠癌（命名为HROC60）中分离的肿瘤浸润性B细胞（TiBc）建立的、经EB病毒（EBV）永生化的人B淋巴母细胞样细胞系。 该亲本肿瘤源自一名成年男性患者，其右侧结直肠癌属于CpG岛甲基化表型高表达（CIMP-H）分子亚型。 新鲜肿瘤组织经机械分离获得单细胞悬液，在环孢素A抑制T细胞和NK细胞增殖的条件下，使用源自B95/8狨猴细胞系的含EBV上清液进行体外选择性永生化处理。 长期扩增后形成单克隆B细胞培养物，经标准化克隆性检测的免疫球蛋白重链和轻链基因重排分析证实。

B-LCL-HROC60主要分泌免疫球蛋白M（IgM）亚型，且在长期培养中保持稳定产率。在结直肠癌衍生的广泛肿瘤浸润性B细胞系系列中，各克隆均仅限分泌单一主要Ig亚型，且在无外源性EBV存在时未发生自发性增殖，排除了体内潜伏EBV驱动的转化。 作为源自CIMP-H型结直肠癌的单克隆、抗原经验丰富的TiBc衍生物系，B-LCL-HROC60为研究结直肠肿瘤微环境中的体液免疫反应、表征肿瘤浸润B细胞衍生物质抗体的功能特性提供了重要的体外模型。

37°C, 5%_CO2, 加湿环境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。

有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。