B-LCL-HROC60

B-LCL-HROC60 — це імунізована вірусом Епштейна-Барра (EBV) лінія клітин B-лімфобластоїдів людини, створена з клітин B, що інфільтрують пухлину (TiBc), виділених з первинної колоректальної карциноми, позначеної HROC60. Батьківська пухлина походила від дорослого пацієнта чоловічої статі з правобічною колоректальною карциномою молекулярного підтипу з високим фенотипом метилування CpG-островів (CIMP-H). Свіжу пухлинну тканину механічно дисоціювали для отримання суспензій одноклітинних клітин, а В-клітини селективно імунізували in vitro за допомогою супернатанта, що містив EBV, отриманого з клітинної лінії B95/8 мармозетки в присутності циклоспорину А для пригнічення росту Т- і NK-клітин. Довготривала експансія призвела до утворення моноклональної культури В-клітин, що було підтверджено аналізом реорганізації генів важких і легких ланцюгів імуноглобуліну за допомогою стандартизованих тестів на клональність.

B-LCL-HROC60 секретує імуноглобулін M (IgM) як домінуючий ізотип, з стабільною продукцією протягом тривалого культивування. У широкій серії ліній В-клітин, що інфільтрують пухлину, отриманих з колоректального раку, секреція імуноглобуліну була обмежена одним основним ізотипом на клон, і спонтанного росту не відбувалося за відсутності екзогенного EBV, що виключає латентну in vivo трансформацію, спричинену EBV. Як моноклональна лінія, що походить від TiBc з колоректальної карциноми CIMP-H, B-LCL-HROC60 забезпечує відповідну in vitro модель для дослідження гуморальних імунних реакцій у мікросередовищі колоректальної пухлини та для характеристики функціональних властивостей антитіл, що походять від В-клітин, які інфільтрують пухлину.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>