B-LCL-HROC60

B-LCL-HROC60은 HROC60으로 명명된 원발성 대장직장암에서 분리된 종양 침윤 B 세포(TiBc)로부터 확립된 엡스타인-바 바이러스(EBV) 불멸화 인간 B 림프모구 세포주이다. 모종양은 CpG 섬 메틸화 표현형-고(CIMP-H) 분자 아형의 우측 대장암을 가진 성인 남성 환자에서 유래되었습니다. 신선한 종양 조직을 기계적으로 분해하여 단일 세포 현탁액을 얻었고, 사이클로스포린 A를 첨가하여 T 세포 및 NK 세포의 증식을 억제한 상태에서 B95/8 마모셋 세포주에서 유래한 EBV 함유 상층액을 사용하여 B 세포를 체외에서 선택적으로 불멸화시켰습니다. 표준화된 클론성 분석을 이용한 면역글로불린 중쇄 및 경쇄 유전자 재배열 분석을 통해 확인된 바와 같이, 장기적인 확장은 단일 클론 B 세포 배양을 초래했습니다.

B-LCL-HROC60은 장기간 배양에서도 안정적으로 면역글로불린 M(IgM)을 주요 이소타입으로 분비한다. 대장암에서 생성된 광범위한 종양 침윤 B 세포주 시리즈 전반에 걸쳐, 면역글로불린 분비는 클론당 하나의 주요 이소타입으로 제한되었으며, 외인성 EBV가 없는 상태에서는 자연적인 증식이 발생하지 않아 생체 내 잠복 EBV에 의한 변형을 배제할 수 있었다. CIMP-H 대장암에서 유래한 단일클론성, 항원 경험 TiBc 유래 세포주인 B-LCL-HROC60은 대장암 종양 미세환경 내 체액성 면역 반응을 연구하고 종양 침윤 B세포 유래 항체의 기능적 특성을 규명하기 위한 적절한 체외 모델을 제공한다.

37°C, 5%_CO2, 습한 대기.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

싸이티온은 제품의 품질과 생존력을 보증합니다. 당사는 당사 시설에서 배송된 후 60일 동안 배양 시작 시 세포가 생존할 수 있음을 보증합니다. 당사는 모든 재료가 분석 증명서 및/또는 제품 시트에 설명된 사양을 준수함을 보증합니다

자세한 내용은 <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">보증서 를 참조하시기 바랍니다