B-LCL-HROC60

B-LCL-HROC60は、原発性大腸癌（HROC60と命名）から分離された腫瘍浸潤B細胞（TiBc）を起源とする、エプスタイン・バーウイルス（EBV）不老化ヒトBリンパ芽球様細胞株である。 親腫瘍は、CpGアイランドメチル化高発現型（CIMP-H）分子サブタイプに属する右側結腸直腸癌を有する成人男性患者に由来する。 生腫瘍組織を機械的に分散して単細胞懸濁液を得、B95/8マーモセット細胞株由来のEBV含有上清を用いて、T細胞およびNK細胞の増殖を抑制するシクロスポリンAの存在下で、B細胞を選択的にin vitroで不死化しました。 長期培養の結果、標準化されたクローナリティアッセイによる免疫グロブリン重鎖および軽鎖遺伝子再構成分析で確認されたように、単クローン性B細胞培養が得られた。

B-LCL-HROC60は、その優性アイソタイプとして免疫グロブリンM（IgM）を分泌し、長期培養においても安定した産生を維持した。結腸直腸癌から生成されたより広範な腫瘍浸潤B細胞株シリーズ全体において、免疫グロブリン分泌は各クローンごとに単一の主要アイソタイプに限定され、外因性EBVが存在しない場合には自然増殖は発生せず、生体内でのEBVによる潜在的な形質転換は排除された。 CIMP-H型大腸癌由来の抗原経験済み単クローン性TiBc細胞株であるB-LCL-HROC60は、大腸癌腫瘍微小環境における体液性免疫応答の解析や、腫瘍浸潤B細胞由来抗体の機能的特性解明に有用なin vitroモデルを提供する。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。