- Tisu
- Ginjal Janin
- Penyakit
- Telah diubah/diabadikan; tidak bersifat tumorigenik (latar belakang sel HEK293)
Dokumen
HEK293-VEGF-TM
Cell line · Nomor produk 305991
Penafian: Harga yang ditampilkan untuk lini sel hanya berlaku bagi pelanggan dari kalangan akademis/nirlaba. Bagi entitas komersial, harganya...
Penyesuaian / Rekomendasi
- HEK293-VEGF-TMCell line€1,600.00
01Informasi umum
- Deskripsi
Pernyataan Penolakan: Harga yang ditampilkan untuk garis sel ini khusus ditujukan bagi pelanggan akademis/nirlaba. Bagi entitas komersial, harganya sekitar €6.250.
Jika Anda mewakili entitas komersial atau tidak yakin kategori mana yang berlaku, silakan hubungi kami.
Sel HEK293-VEGF-TM adalah sel ginjal embrio manusia 293 (HEK293) yang direkayasa untuk secara stabil mengekspresikan bentuk faktor pertumbuhan endotel vaskular (VEGF) yang terikat membran, yang umumnya dirancang untuk menampilkan VEGF di permukaan sel melalui fusi dengan domain transmembran. Berbeda dengan isoform VEGF larut yang disekresikan ke lingkungan ekstraseluler, konstruksi VEGF-TM memungkinkan presentasi lokal dan berkelanjutan ligan VEGF pada membran plasma, memfasilitasi penyelidikan terkontrol terhadap interaksi reseptor VEGF dan mekanisme sinyal sel-ke-sel. Model rekayasa ini berguna untuk mempelajari jalur sinyal angiogenesis yang dimediasi terutama melalui VEGFR1 (FLT1) dan VEGFR2 (KDR), yang mengatur proliferasi endotel, migrasi, permeabilitas vaskular, dan neovaskularisasi.
Sel HEK293-VEGF-TM banyak digunakan dalam penelitian angiogenesis dan pengembangan terapeutik untuk karakterisasi antibodi yang menargetkan VEGF, perangkap reseptor, biologik anti-angiogenik, dan terapi sel imun yang dimodifikasi. Presentasi VEGF yang terikat membran memungkinkan penilaian kuantitatif terhadap ikatan reseptor, aksesibilitas ligan, blokade antibodi, penggumpalan reseptor, dan peristiwa sinyal yang bergantung pada kontak sel. Sel-sel ini sangat berharga dalam uji ikatan berbasis sitometri aliran, sistem ko-kultur, uji pelapor, dan platform skrining berkapasitas tinggi yang mengevaluasi penghambatan jalur VEGF/VEGFR. Selain itu, model HEK293-VEGF-TM dapat mendukung studi yang meneliti pembentukan sinapsis dan pengenalan target oleh sel CAR-T yang diarahkan oleh VEGF atau platform antibodi bispesifik.
- Tisu
- Ginjal Janin
- Penyakit
- Telah diubah/diabadikan; tidak bersifat tumorigenik (latar belakang sel HEK293)
- Aplikasi
- Penelitian tentang VEGF transmembran (VEGF-TM); pengembangan antibodi anti-VEGF; studi angiogenesis tumor; uji ADCC/CDC; sitometri aliran; penelitian di bidang onkologi dan oftalmologi
02Klasifikasi
- Organisme
- Manusia
- Seks
- Perempuan
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Pengikut
- Status GMO
- GMO-S1
- Rincian status GMO
- GMO-S1: This HEK293 cell line contains a transmembrane VEGF (VEGF-TM) expression construct for cell-surface VEGF studies and anti-angiogenic therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Seperti epitel
- Jenis sel
- Sel epitel
- Waktu penggandaan
- sekitar 24–36 jam
04Pengidentifikasi
- Referensi
- HEK293-VEGF-TM (Nomor katalog Cytion 305991)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6G30
05Ekspresi dan kerentanan
- Reseptor yang diekspresikan
- VEGF-TM
06Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Lengkapi media dengan 10% FBS, 1 mM natrium piruvat, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Tambahkan Geneticin (G418-Sulfat) untuk mencapai konsentrasi akhir 1 mg / mL.
- Reagen disosiasi
- Tripsin-EDTA
- Perbanyakan sel
- Untuk kultur sel yang melekat secara rutin: Aspirasi media kultur lama dari sel yang melekat, dan cuci dengan PBS untuk menghilangkan media yang tersisa. Setelah menyedot PBS, tambahkan volume larutan Trypsin/EDTA yang sesuai berdasarkan ukuran bejana kultur (misalnya, 1 ml untuk labu T25, 3 ml untuk labu T75) dan inkubasi pada suhu kamar atau 37 ° C hingga sel terlepas (5-10 menit). Pantau pelepasan di bawah mikroskop, dan ketuk bejana dengan lembut jika perlu untuk melepaskan sel. Setelah terlepas, tambahkan media lengkap untuk menonaktifkan Trypsin/EDTA, resuspensi sel dengan hati-hati, dan pindahkan alikuot suspensi sel ke dalam bejana kultur baru yang berisi media segar. Tempatkan bejana dalam inkubator yang diatur pada suhu 37°C dengan 5%CO2, dan ganti medium setiap 2-3 hari.
- Rasio pemisahan
- 1 sampai 5
- Kepadatan penanaman
- 2 hingga 4 x 10⁴ sel/cm²
- Pergantian cairan
- 2 hingga 3 kali per minggu
- Pemulihan pasca-pencairan
Setelah pencairan, pisahkan sel dengan rasio 1:2 hingga 1:3 dalam labu T25 dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan dan melekat setidaknya selama 24 jam.
Untuk perlekatan dan viabilitas terbaik setelah pencairan sel, kami sarankan untuk menggunakan labu atau pelat yang dilapisi kolagen untuk penyemaian awal setelah pemulihan krio. Lapisan kolagen tidak diperlukan untuk kultur rutin sel selanjutnya.
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
08Donatur
- Usia donor
- Janin
09Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Berlaku ketentuan perjanjian pihak ketiga
- Ya
.jpg)
